欢迎来到本生(天津)健康科技有限公司网站!
网站导航
技术文章
当前位置:主页 > 技术文章 >绵羊胶原蛋白III型(Col Ⅲ)酶联免疫分析试剂盒说明

绵羊胶原蛋白III型(Col Ⅲ)酶联免疫分析试剂盒说明

发布时间:2021-09-03    点击次数:62

  绵羊胶原蛋白III型(Col Ⅲ)酶联免疫分析试剂盒

  本试剂盒仅供研究使用。

  检测范围:96T

  0μg/L -5μg/L

  使用目的:

  本试剂盒用于测定绵羊血清、血浆及相关液体样本中胶原蛋白III型(Col Ⅲ)含量。

  实验原理

  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中绵羊胶原蛋白III型(Col Ⅲ)水平。用纯化的绵羊胶原蛋白III型(Col Ⅲ)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入胶原蛋白III型(Col Ⅲ),再与HRP标记的胶原蛋白III型(Col Ⅲ)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的胶原蛋白III型(Col Ⅲ)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中绵羊胶原蛋白III型(Col Ⅲ)浓度。

  绵羊胶原蛋白III型(Col Ⅲ)酶联免疫分析试剂盒组成

  试剂盒组成
  1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 ; 2 酶标试剂 6ml×1 瓶
  3 酶标包被板 12 孔×8 条 ; 4 样品稀释液 6ml×1 瓶
  5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 ; 6 显色剂B 液 6ml×1/瓶
  7 终止液 6ml×1 瓶; 8 标准品(48ng/ml) 0.5ml×1 瓶
  9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶; 10 说明书 1 份
  11 封板膜 2 张; 12 密封袋 1 个

  标本要求

  1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

  2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

  操作步骤

  1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

  2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

  3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

  4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

  5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

  6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

  7.温育:操作同3。

  8.洗涤:操作同5。

  9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.

  10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

  11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

  绵羊胶原蛋白III型(Col Ⅲ)酶联免疫分析试剂盒操作程序总结:

操作程序总结:.png

  计算

  以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

  绵羊胶原蛋白III型(Col Ⅲ)酶联免疫分析试剂盒注意事项

  1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

  2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

  3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

  4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

  5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

  6.底物请避光保存。

  7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

  8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

  9.本试剂不同批号组分不得混用。

  保存条件及有效期

  1.试剂盒保存:2-8℃。

  2.有效期:6个月

  天津本生ELISA试剂盒公司得到广泛的应用,长期和各大高校、研究机构等建立了深厚的合作关系,为科研事业贡献绵薄之力!本生(天津)健康科技有限公司由具有行业背景和丰富市场经验的专业人士组成,于为生命科学研究领域提供产品,为广大科研工作者提供服务。 既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求,也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。


如果您有任何问题,请跟我们联系!

联系我们

版权所有©2021 本生(天津)健康科技有限公司 备案号:津ICP备19006588号-2 sitemap.xml 技术支持:制药网 管理登陆

地址:天津市武清开发区创业总部基地五号楼

在线咨询 联系方式 二维码

服务热线

15502280592

扫一扫,关注我们