人Ⅰ型胶原α1(COL1α1)ELISA试剂盒操作方法

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　　人Ⅰ型胶原试剂盒操作注意事项:

　　1、试剂应按标签说明书储存，使用恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

　　2、实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。

　　3、不同批号的试剂不要混用。

　　4、人Ⅰ型胶原试剂盒保质使用。

　　5、使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

　　6、使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。

　　7、实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致，以所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

　　人Ⅰ型胶原试剂盒样品收集、处理及保存方法:

　　1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

　　2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

　　3、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟。

　　4、取上清液保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。

　　注意：尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

　　人Ⅰ型胶原试剂盒性能：

　　1、灵敏度：小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.1 ng/mL。

　　2、特异性：不与其它细胞因子反应。

　　3、重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

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