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低吸附离心管的一些关键点!

发布时间:2021-12-21    点击次数:1248

  低吸附离心管的一些关键点!


  低吸附离心管常用于对蛋白质进行浓缩和除盐操作,对色谱洗液和生理梯度片断进行缓冲液交换或者除盐操作,从细胞的细菌培养上清液或者溶菌液中回收生物分子。清洗和浓缩乳胶悬浮液,离心管通常不需要预处理即可使用,不过对于蛋白质样本处理,特别是较稀的蛋白溶液来说,用膜浓缩,回收率常常是不定量的,虽然PES材料使非特异性吸附最小化,但是,某些蛋白,特别是稀的时候会有问题,非特异性结合的程度随着个别蛋白结构的不同而不同,含有带电的或者疏水结构的蛋白质更易于不可逆结合到不同表面。

  低吸附离心管离心时注意事项:避免过长时间或者高速离心,虽然我们产品有防死端设计,可避免过度离心造成膜表面干燥而造成不可逆吸附,避免过度浓缩,终体积越小,越容易因表面吸附而损失得率,离心后采用轻轻吹吸几次滤膜截留的溶液,必要时补加一定体积的缓冲液冲洗膜表面,有助于减少膜表面吸附,能提高回收率,尽量避免TIPS接触膜表面。

  对于低吸附离心管表面做钝化预处理可降低蛋白质在膜表面的吸附性损失,大多数情况下,在浓缩稀释蛋白溶液之前预处理柱子可以提高回收率,因为溶液可填满膜和表面暴露的空白蛋白吸附位点,钝化的方法是预先用高容积的钝化溶液预浸泡柱子一小时以上,蒸馏水冲洗柱子,再用蒸馏水离心一次以除去可能残留在膜上的钝化溶液,注意钝化处理后别让膜干了,如果要留待以后使用,需要加无菌蒸馏水保持膜湿润。

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