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大鼠同型半胱氨酸 Hcy ELISA试剂盒实验说明

更新时间:2022-09-07    点击次数:883

  大鼠同型半胱氨酸 Hcy ELISA试剂盒相关产品

  实验原理:

  本试剂盒应用双夹心法测定标本中兔层粘连蛋白(LN)水平。用纯化的兔层粘连蛋白(LN)捕获包被微孔板,制成固相,往包被的微孔中依次加入兔层粘连蛋白(LN),再与HRP标记的检测结合,形成-抗原-酶标复合物,经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的兔层粘连蛋白(LN)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中兔层粘连蛋白(LN)含量。

  样品采集:

  收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时,-20℃可保存凝血因子IXELISA试剂盒

  自备物品:

  1 、 37 ℃ 恒温箱

  2 、 标准规格酶标仪

  3 、 精密移液器及一次性吸头

  4 、 蒸馏水

  5 、 一次性试管

  6 、 吸水纸

  大鼠同型半胱氨酸 Hcy ELISA试剂盒样本处理及要求:

  1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

  2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

  3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

  4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

  5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

  6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.

  7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3辣根过氧化物酶的(HRP)活性。


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