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PCR八联管用户可以选择负压或离心法使用

发布时间:2022-09-26    点击次数:79
   在平时的生活场所你可能很难看到PCR八联管,但在生物实验室中,它可是一位“常客”,是用于PCR实验的塑料离心管,材料是用最高等级的医用级聚丙烯配方改良而成。采用光学平盖,使整个盖看起来光滑明亮,没有任何痕迹,大大提高了PCR检测器的时间通过率。
  PCR八联管用户可以选择负压或离心
  A、负压法
  1、正确连接负压装置,将96孔DNA制备板放在负压装置上;在PCR,酶消化,酶标记或测序反应溶液中加入3倍缓冲液PCR-A(如果缓冲液PCR-A小于100μl,加入100μl);充分混合并转移至96孔DNA制备板,打开并调节负压至-25-30英寸汞柱,并缓慢吸出板中的溶液。
  2、加入0.3ml缓冲液W2并吸收溶液。用相同的方法用0.3ml缓冲液W2洗涤两次。
  确认在试剂瓶上的指定体积的缓冲液W2浓缩物中加入无水乙醇。
  3、维持负压并提取96孔DNA制备板10分钟。
  4、在长纤维组织上将96孔DNA制备板粉碎6次,引流管朝下。
  5、将96孔DNA制备板置于96孔V形板上,加入25-30ul水或洗脱至膜中心,在室温下静置1分钟。通过以3000×g离心5分钟洗脱DNA。
  B、离心
  1、在PCR,消化,酶标记或测序反应中加入3倍体积的BufferPCR-A(如果BufferPCR-A小于100μl,加100μl);混合并转移到制备板96孔中的96孔DNA中。将DNA制备板置于96孔1.6ml深孔板中,以1000×g离心1分钟,弃去滤液。
  2、在96孔DNA制备板中,加入0.3ml缓冲液W2,以1000×g离心1分钟,弃去滤液。用0.3ml缓冲液W2以相同方式再次洗涤。确认在试剂瓶上的指定体积的缓冲液W2浓缩物中加入无水乙醇。
  3、将96孔DNA制备板置于96孔1.6ml深孔板中,并以3000×g离心10分钟。
  4、将96孔DNA制备板置于干净的96孔V形底板中,加入25-30ul水或洗脱至膜中心,在室温下静置1分钟。通过以3000×g离心5分钟洗脱DNA。
  注意事项:
  1、将洗脱液或水加热至65°C有助于提高洗脱效率。
  2、DNA分子是酸性的,建议储存在2.5mMTris-HCl,pH8.5洗脱液中。
 

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