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天津本生—DMEM(低糖)的注意事项和使用步骤

更新时间:2023-03-10    点击次数:1350

  天津本生—DMEM(低糖)的注意事项和使用步骤


  DMEM培养基是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基,是在MEM培养基的基础上研制的。

  与MEM比较增加了各种成分的用量,同时又分为高糖型(低于4500gm/L)和低糖型(低于1000mg/L)。

  DMEM低糖培养基用于养干细胞可防分化,DMEM高糖可养大多数哺乳动物的细胞。

  注意事项:

  1、培养及长期放置,需要2-8℃避光保存,请勿低温冻存。

  2、培养基中添加的L-谷氨酰胺在溶液中不稳定、易分解,长期放置后使用若发现细胞生长变慢可以在使用前加入适量的L-谷氨酰胺,来维持细胞正常代谢。

  3、含有NaHCO3的培养基开瓶次数较多后培养基内的CO2会逐渐溢出,PH值上升,培养基的颜色会偏紫色。

  培养基偏碱性会造成细胞生长停滞或死亡,建议分装成小瓶使用或用HEPES调整至正常PH范围。

   DMEM(低糖)使用步骤:

  1、准确称量试剂:根据不同菌类的用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。

  2、校正PH值:将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线、加热溶解、补充水分、测定酸碱度,常用PH6.8-8.0的精密试纸或酸度计测定。

  用1NNaOH和1NHCI调节PH值到适宜范围内。

  3、过滤:将玻璃漏斗置铁架上,再用DMEM低糖纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。

  4、分装:将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内,塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。

  5、灭菌:培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。

  一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽孢有较强的抗热性,需经高压蒸气灭菌才能达到灭菌的目的。

  根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理,即压力越大,蒸汽温度就越高。

  因此,在同一温度条件下,采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。

  而在湿热情况下,菌体吸收水分后,其蛋白质易于凝固变性,因为蒸汽的穿透力强,杀菌效果好。

   DMEM(低糖) 本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。


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