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必知干货—DAB染色液的使用方法及注意事项

更新时间:2023-03-13    点击次数:1875

  必知干货—DAB染色液的使用方法及注意事项


  DAB染色液用于免疫组化染色,应用在Dako 自动染色系统上。

  DAB染色液的使用方法

  1.DAB显色液配制

  10mM Tris-HCl (pH7.6) 9mL +DAB (diaminobezidin 3,3-二氨基联苯胺) +0.3%(W/V) NiCl2 或CoCl2 1mL ,显色时加入5-10mL 30%H2O2 混匀后立即使用

  2. 显色

  准备好含有待测蛋白的固相膜:包括电泳、转印、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤。

  3.加入适量的DAB显色液,铺满整个固相膜表面(可按比例增减)。

  4. 置于平式摇荡仪上,在室温下孵育2至5分 钟,避免光照(暗室操作),直至棕褐色沉淀出现。

  5.用镊子夹起固相膜,放进无离子水里清洗。

  6.空气中晾干。

  7. 拍照记录 。

  DAB染色液的注意事项

  1. DAB溶液应低温密封保存。如有结晶析出,应确保结晶溶解再行使用;

  2. 显色工作液应现用现配,新鲜配制的工作液应为无色或浅棕色,如颜色过深,请勿使用;

  3. DAB在常温下不稳定,每次取用后均应及时加盖密封放回冰箱,以免因DAB分解影响实验,或因渗漏造成实验环境污染;

  4. DAB有潜在致突变作用,操作时应注意穿戴好防护用具。

  DAB染色液 本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。


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