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本生PCR板—96孔板铺板的小技巧

更新时间:2023-03-16    点击次数:1362

  本生PCR板—96孔板铺板的小技巧


  96孔板进行铺板的?当细胞用96孔板接种时,细胞经常是不均匀分布。第二天就会发现有些地方出现堆积性生长,而还有不少地方细胞则很稀疏,细胞密集的地方因细胞与细胞之间的接触抑制影响细胞的生长,这样就很难评价干预因素对细胞的作用。因此,将96孔板种均匀也是进行后续实验的将以用的老办法和用的新方法比较一下,以让大家看看各自优缺。

  1、老方法:植板后,用手拿起96孔板,左右摇动,然后来回摇动几次,但这种方法通常在2-3个细胞的5口井中分布不均匀。  在大多数情况下,中间的孔会出现成堆的分布,会让人感到一阵麻烦。 再一次,看到一位老师将电路板放在振动器上并摇动几分钟。 结果更糟。 细胞都在中间。

  通常,会在96孔板的每个孔上,加入100微升的细胞悬浮液。把它从左边加到洞底。加入一半板材后,与未加入的细胞悬浮液混合,然后继续加入剩余的一半板材。盖上盖子后,用左手轻轻握住木板的左边,然后用右手轻拍木板的右边缘。注意力集中在力量上(通常敲击它三次)。太多或太多次会导致细胞堆积。顺时针转动盘子(逆时针方向不好)  ,将剩下的三面逐一拍打,静置5分钟左右,然后放入37度的培养箱中。本生荧光定量PCR板

  2、新方法:这种方法是非常好,非常均匀播种。使用等速吸引吸取细胞,然后吸移嘴对孔(注意尖不接触孔枪头底部)的侧壁上,然后再慢慢敲除细胞吸管定植后,不要摇晃板,它只是可以直接在显微镜下被放置,这个方法可以被说成是有效的。

  补充:从6孔板到96孔板,细胞应均匀分布分散。用培养基进行稀释细胞,然后将培养板放置在适当的位置。添加一个细胞时和之后,请勿移动能力培养板;如果在空气中没有介质吹入,但是不要移动培养板,加入细胞后,静置20-30分钟,然后可以将其移入培养箱。这样,细胞结构通常具有均匀生长。当然,提是细胞消化系统良好。

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