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BUNSEN本生—elisa实验中抗原抗体具体反应

更新时间:2023-03-21    点击次数:3713

  BUNSEN本生—elisa实验中抗原抗体具体反应

 

  抗原抗体具体反应之可逆性

  Ag·Ab 的解离程度与K 值有关。高亲和力抗体的抗原结合点与抗原的决定簇在空间构型上非常适合,两者结合牢固,不易解离。解离后的抗原或抗体均能保持原有的结构和活性,因此可用亲和层析法来提纯抗原或抗体。

  在抗血清中,特异性的IgG 抗体仅占总IgG 中的极小部分。用亲和层析法提取的特异性抗体,称为亲和层析纯抗体,应用于免疫测定中可得到更好的效果。

  抗原抗体具体反应之适比例

  在恒定量的抗体中加入递增量的抗原形成抗体复合物(沉淀)的量见图1-4。曲线的高峰部分是抗原抗体比例*合适的范围,称为等价带(zone of equivalence )。

  在等价带前后分别为抗体过剩带和抗原过剩带。

  如果抗原或抗体极度过剩,则无沉淀物形成,在免疫测定中称为带现象(zone phenomenon )。抗体过量称为前带(prezone),抗原地过量称为后带(postzone)。

  在用免疫学方法测定抗原时,应使反应系统中有足够的抗体量,否则测得的量会小于实际含量,甚至出现假阴性。

  抗原抗体具体反应之特异性

  抗原抗体的结合实质上只发生在抗原的抗原决定簇与抗体的抗原结合位点之间。由于两者在化学结构和空间构型上呈互补关系,所以抗原抗体反应具有高度的特异性。

  例如乙肝病毒中的表面抗原( HBsAg )、e 抗原(HBeAg)和核心抗体(HBcAg),随来源于同一病毒,但仅与其相应的抗体结合,而不与另外两种抗体反应。

  抗原抗体反应的这种特异性使免疫测定能在一非常复杂的蛋白质化合物(例如血清)中测定某一特定的物质,而不需先分离待检物。

  但是这种特异性也不是的,假使两种化合物有着部分相同的结构,在抗原抗体反应中可出现交叉反应。例如:绒毛膜促性腺激素( hCG)和黄体生成激素(LH)均由α和β两个亚单位组成,其结构的不同处在β亚单位,而两者的α亚单位是同类的。

  用hCG 免疫动物所得的抗血清中含有抗α-hCG 和抗β-hCG 两种抗体,抗α-hCG 抗体将与LH 中的α酶位发生交叉反应。在临床检验中,如用抗hCG 抗血清作为诊断试剂检定尿液中hCG,只能用于hCG 浓度较高的试验,否则妇女生理性排泄入尿液中的微量LH 将与之发生交叉反应。

  因此在作为早孕诊断(敏感度应达到50mIu/mlhCG )的实际中必须应用只对hCG 特异的抗β-hCG,以避免与其它激素的交叉反应的发生。

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