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什么是冻干试剂管,制备冻干管的过程操作您知道多少?

更新时间:2023-07-07    点击次数:3705

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  制备冻干管的操作步骤是什么?

  1.安瓿管准备

  安瓿管材料以中性玻璃为宜。清洗安部管时,先用2%盐酸浸泡过夜,自来水冲洗干净后,用蒸馏水浸泡至pH中性,干后、贴上标签,标上菌号及时间,加入脱脂棉塞后,121℃下高压灭菌15-20分钟,备用。

  2.保护剂的选择和准备

  保护剂种类要根据微生物类别选择。配制保护剂时,应注意其浓度及 pH值,以及灭菌方法。如血清,可用过滤灭菌;牛奶要先脱脂,用离心方法去除上层油脂,一般在100℃间歇煮沸2-3次,每次10-30分钟,备用。

  3.冻干样品的准备

  在最适宜的培养条件下将菌种培养至静止期或成熟期,进行纯度检查后,与保护剂混合均匀,分装。微生物培养物浓度以细胞或孢子不少于 108-1010个ml为宜(以大肠杆菌为例,为了取得每毫升1010个活细胞菌液2毫升-2.5毫升,只需10毫升琼脂斜面两支)。

  4.预冻

  般预冻2小时以上,温度达到-20℃到-35℃左右。

  5.冷冻干燥

  采用冷冻干燥机进行冷冻干燥。

  将冷冻后的样品安部管置于冷冻干燥机的干燥箱内,开始冷冻干燥,时间一般为8-20小时。

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