血清必须热灭活吗、对此BUNSEN带您了解相关疑问！

　　血清必须热灭活吗、对此BUNSEN带您了解相关疑问！

　　血清热灭活是许多细胞培养者探讨的话题，许多科研的小伙伴拿到一瓶全新的血清，总会犹豫血清究竟要不要进行灭活处理、血清灭活要怎样操作、在什么情况下要对血清进行灭活等等，关于这些疑问，BUNSEN本生技术小编今天就为大家做一个详细的解答。

　　一、什么是热灭活?

　　一般情况下，血清的热灭活是在血清全部解冻后，置于56℃水浴中30分钟进行处理。如果为了更好的保留血清的营养成分，减少热灭活对血清的损伤，可以将血清置于40℃水浴中20分钟进行热灭活。

　　二、血清为什么要热灭活?

　　很多人认为，血清热灭活是为了消灭血清中的细菌、病毒等微生物，其实不然，一瓶合格的血清，在生产过程中，会严格把控血清中微生物的指标。一般情况下，用户买到的血清，都是无菌的，可以在解冻后直接进行使用。

　　对血清进行热灭活处理，实际是为了使血清中的补体失活。补体是一种血清蛋白质，存在于人和脊椎动物血清及组织液中，不耐热，活化后具有酶活性、可介导免疫应答和炎症反应。可被抗原-抗体复合物或微生物所激活，导致病原微生物裂解或被吞噬。

　　三、胎牛血清需要灭活吗?

　　胎牛血清是来自未分娩的胎牛，经心脏穿刺采血，后经其他步骤制备而来的。这个阶段的血清中，未形成完整的补体系统，不会真正的干预免疫。胎牛血清中含有诸如生长因子、维生素、氨基酸等珍贵物质，将血清置于56℃水浴30分钟，会导致这些珍贵的营养物质流失，对血清造成不小的伤害，所以一般情况下，胎牛血清不需要热灭活处理。

　　四、什么情况下需要热灭活处理血清?

　　当实验涉及以下情况时，建议去除血清可能带来的补体系统的干扰：

　　1、诱导胚胎干细胞分化

　　2、免疫学研究

　　3、培养平滑肌细胞

　　4、其他补体参与的细胞培养过程

　　5、利用昆虫细胞研究病毒感染

　　因此，当涉及到一些对补体比较敏感的实验，并且血清中补体浓度相对比较高，可能存在对实验的影响时，需要考虑对血清进行热灭活。

　　五、血清热灭活为什么会产生大量沉淀?

　　1、血清灭活后出现的沉淀大多数是纤维蛋白析出，属正常现象。灭活过程中，多次摇晃血清，使血清受热均匀可以降低蛋白的析出。

　　2、当血清在未解冻状态时，直接置于56℃水浴，灭活过程中血清局部受热温度过高，加热时间过长就会产生胶状沉淀，这样的血清质量严重受损，是无法继续正常使用的。

　　总之，多数细胞培养中血清的热灭活并不是必要的。很多场合下，热灭活并不会改善细胞的生长，却降低了支持细胞生长的能力。即使在少数有促进的情况下，其促进的比率也是微不足道的。另外，血清的热灭活导致的沉淀常常被认为是微生物的污染，从而给用户和供应商都带来不必要的麻烦。我们建议，对于那些对血清进行灭活的用户，需要通过试验来证实其必要性，确定灭活的适当条件;在灭活过程中，需要严格认真监测，并选择一个可重复的方案进行操作。

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