知识讲解：培养基保存条件及相关灭菌的有关问题

　　知识讲解：培养基保存条件及相关灭菌的有关问题
 

　　培养基的保存条件：

　　1.建议按照产品说明书的要求放置在推荐的储存条件。

　　2.干粉培养基：即使能一定程度上抵御光和湿度，但是建议客户还是存放在干燥避光的环境。干粉的最佳储存温度是15-25 °C (59-77 °F)。长时间存放导致的pH值变化可能通过酸碱调节。干粉培养基是容易吸湿的，所以瓶盖应该尽量保持盖紧。吸水后的干粉可能导致pH变化并且结块。明显结块且不易用药匙压碎的干粉培养基不建议继续使用，因为内部化学成分可能发生变化。

　　3. 对于配好的培养基，温度是4-12°C且避光保存。装在密闭容器或密封袋中避免污染和水分流失。含有血、蛋黄等高营养成分的培养基应该放在2-8°C 存放。放入密闭容器前的平板需要保持干燥并且温度不能太高。否则在密闭容器中产生太多凝结水会导致污染。失水超过15%的琼脂可能影响微生物生长，尤其可能影响革兰氏阴性菌。液体培养基过度失水也会导致某些成分的沉淀和结晶。

　　培养基灭菌问题：

　　1.培养基的配制是否都需要高压灭菌，多长时间比较合适?

　　培养基配制方法，建议首先参考产品说明书指示的配制、灭菌操作的指示，进行操作。

　　含有琼脂的干粉培养基需要加热煮沸，因为琼脂的溶点在96°C左右。需要保证各成分充分混匀。热水溶解无法代替加热煮沸。培养基未煮沸状态为浑浊，随着加热煮沸，颗粒溶解，培养基会变澄清，且不含有块状。一般培养基沸腾后，观察到澄清，且没有明显的不溶块状或胶状物即可。

　　有些培养基含有温度敏感的成分，不能高压灭菌，因此在操作上需要格外注意，需要参考说明书的具体操作。

　　2.已经辐照灭菌的培养基还能高温高压再灭菌吗?

　　已经辐照灭菌的培养基，通常不建议再高温高压灭菌或其他加热手段。如果无菌模拟灌装实验需要模拟过滤灭菌以及高温高压蒸汽灭菌的两个过程，通常灭菌后的培养基仍然能够提供足够营养以保证微生物生长，但是强烈建议使用者在模拟过程中加测微生物促生长实验。

　　3.干粉或颗粒培养基使用说明书中121℃灭菌15分钟是指灭菌的过程时长吗?

　　培养基说明书中121℃灭菌15分钟是指高压蒸汽灭菌法，在温度达到121℃，持续灭菌15min。建议首先确认灭菌设备的原理为高压蒸汽灭菌法，而且灭菌过程是符合相关灭菌效果验证的，以确保培养基得到有效灭菌。

　　备注：以上信息仅供参考，具体信息说明及操作以厂家说明书为准。

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