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本生阐述影响ELISA试剂盒灵敏度出现问题及解决办法

更新时间:2023-10-10    点击次数:939

  本生阐述影响ELISA试剂盒灵敏度出现问题及解决办法


  ELISA试剂盒试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。BUNSEN本生技术小编详解:将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结一下,以期给同行带来—些启发,提高试验质量。

  1、超过有效期。试剂盒必须在有效期内使用,超过有效期的产品可能会产生很弱的信号。

  2、试剂盒没有按规定进行保存,受高温影响。

  3、试剂、样品用前未平衡至室温

  4、加入试剂的体积和时间有误,移液器计量不准,吸嘴内水分太多或不清洁。

  5、洗板及加样过程中,酶标受污染失活而失去催化显色剂显色的能力,

  6、孵育时间及孵育温度未达到要求,反应板放入培养箱时注意温度并及时调整。

  7、洗板次数过多,或浓缩洗液稀释倍数不符合要求,洗涤冲击力太大,浸泡时间太长等,

  8、显色剂加量不足或顺序颠倒,或混合后加入。

  9、底物作用时间不够,

  10、燕馏水水质有问题


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  ELISA试剂盒灵敏度出现问题相应的解决方法

  1、实验前检查试剂的组分及批号,确认试剂未过期,

  2、不要将试剂盒长时间置于常温下,按便用规定储藏。

  3、试剂、样品用前平衡至室温

  4、确定所使用的试剂体积正确,加入时间适当。校正移液器,移液器与吸晚配合要紧密吻合。移液不宣太快,尽量排放完。

  5、确认盛酶标的容器不含酶抑制剂如爱氮钠等,确认配制洗液的容器已洗千净,确认配制洗液的纯化水达到要求且未受污染。

  6、孵育温度应控制在37-38C,孵育时间严格按照说明书操作。保温期内不宜多开门,以免影响保温。

  7、严格按说明书要求稀释浓缩洗液及洗板,减小洗涤冲击力,按说明书要求置留洗涤液时间和洗涤次数,

  8、显色剂滴瓶垂直向下,持力均匀,滴速不宜过快,先加显色剂A,后加显色剂B,不可将A、B液混合。

  9、准确定时。

  10、测定燕馏水配制试剂对酶免疫法的影响。

  ELISA试剂盒 本生是实验室本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。

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