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BUNSEN本生:ELISA实验疑难问题解答

更新时间:2023-11-29    点击次数:1385
  BUNSEN本生:ELISA实验疑难问题解答
 
  ELISA实验做了很多次,可是结果还是有偏差?可能很多同学都会出现这样的问题,那么问题到底出在哪呢,今天BUNSEN本生小编就来给大家总结一下,ELISA实验中会经常遇见的问题。
 
  1.非正常的样本值
 
  ①不正确的收集或保存
 
  解决方案:确保正确的底物体积混合。如果底物是冻干粉,用相应缓冲液重悬*,充分混合并在一定时间内使用。
 
  ②不正确的样本制备
 
  说明书中样本制备方法已经过性能测试验证,严格按照说明书推荐进行。确保使用正确的校正稀释液。
 
  2.信号强度增长不充分
 
  ①底物准备有误
 
  解决方案:确保正确的底物体积并混合。如果底物是冻干粉,用相应缓冲液重悬*,充分混合并在一定时间内使用。
 
  ②每孔底物添加体积有误
 
  解决方案:保证移液器正常工作,必要时进行重新校正。保证移液器吸头连接紧密。
 
  ③孵育时间或温度有误
 
  解决方案:严格按照推荐的孵育时间和温度进行实验,避免在环境条件变化的位置孵育96孔板(如放在通风处或窗台边)。
 
  ④偶联物或底物准备有误
 
  解决方案:确保混合相同体积的偶联物和底物。加入后会立即显色。底物在使用前应避光保存。
 
  ⑤仪器设置不正确
 
  解决方案:确保酶标仪使用了正确的滤光片,确保按照说明书,正确的配置仪器参数。
 
  3.边缘效应
 
  ①工作台温度不均衡
 
  解决方案:避免在环境条件变化的位置孵育,如放在通风处或窗台边。
 
  ②体系液体蒸发
 
  解决方案:保证移液器正常工作,必要时进行重新校正。保证移液器吸头连接紧密。
 
  ③叠板
 
  孵育时避免叠板。
 
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