单胺氧化酶(MAO)活性检测试剂盒实验原理及操作步骤

　　单胺氧化酶(MAO)活性检测试剂盒实验原理及操作步骤

　　有效期：6个月

　　储存条件:2-8℃

　　推荐:若使用96孔板测定，需使用96孔UV板，推荐货号YA0602

　　英文名称:Monoamine Oxidase(MAO)Activity Assay Kit

　　别名:单胺氧化酶试剂盒 单胺氧化酶测试盒

　　检测方法:微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader

　　注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。

　　规格:100T/96S

　　MAO(EC1.4.3.4)包括MAO-A和MAO-B，是一种结合在线粒体外膜上的黄素蛋白，可催化神经递质和生物胺氧化脱氨。单胺氧化酶与机体老化有关，被认为是衰老的标志，其主要存在于脊椎动物的各种器官，特别是分泌腺、脑、肝脏，在无脊椎动物、豆类的芽等植物中也存在催化单胺类物质代谢，含量较低，具有重要的生理功能。

　　MAO催化单胺类底物脱氨生成相应的醛，进一步氧化成酸，底物在360nm处有特征吸收峰，通过测定360nm处光吸收下降的速率，可计算MAO活性。

　　若使用96孔板测定，需使用96孔UV板

　　产品说明：

　　MAO(EC1.4.3.4)包括 MAO-A 和 MAO-B，是一种结合在线粒体外膜上的黄素蛋白，可催化神经递质和生物胺氧化脱氨。单胺氧化酶与机体老化有关，被认为是衰老的标志，其主要存在于脊椎动物的各种器官，特别是分泌腺、脑、肝脏，在无脊椎动物、豆类的芽等植物中也存在催化单胺类物质代谢，含量较低，具有重要的生理功能。

　　MAO 催化单胺类底物脱氨生成相应的醛，进一步氧化成酸，底物在 360nm 处有特征吸收峰，通过测定 360nm处光吸收下降的速率，可计算 MAO 活性。

　　Monoamine Substrate(360nm) Acids

　　注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

　　需自备的仪器和用品：

　　紫外分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅/恒温培养箱中、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔 UV 板、震荡仪、蒸馏水。

　　操作步骤：

　　一、样本处理(可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献)

　　1、 临用前根据实验用量取出部分提取液一、提取液二和试剂一置于 4℃预冷 30min。

　　2、 组织样本：按照样本质量(g)：提取液一体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL提取液一)加入提取液一，冰浴匀浆;1000g 4℃离心 10min，取上清，将上清液转移至预冷的离心管，于 10000g，4℃离心 30min。弃上清，沉淀中加入 1mL 预冷的提取液二，振荡混匀，于 16000g，4℃离心 40min，弃上清，加入 1mL 试剂一，振荡混匀，置冰上待测。

　　3、 细菌或细胞样本：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清，按照细菌或细胞数量(104 个)：提取液一体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液一)加入提取液一，超声波破碎细菌或细胞(冰浴，功率 200W，超声 3s，间隔 7s，总时间 3min)，1000g，4℃离心 10min，取上清，将上清液转移至预冷的离心管，于 10000g，4℃离心 30min。弃上清，沉淀中加入 1mL 预冷的提取液二，振荡混匀，于 16000g，4℃离心 40min，弃上清，沉淀中加入 1mL 试剂一，振荡混匀，置冰上待测。

　　4、 血清(浆)或液体样本：直接检测。若溶液浑浊则离心后取上清进行测定。

　　糖原磷酸化酶b(GPb)活性检测试剂盒 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。本生试剂盒