液氮冻存管操作指南：从分装到存储的完整流程解析

　　液氮冻存管操作指南：从分装到存储的完整流程解析

　　天津本生液氮冻存管操作全流程指南

　　一、‌前期准备‌

　　冻存管选择‌

　　优先选用聚丙烯(PP)材质内旋盖冻存管，耐-196℃低温且密封性强。

　　容量建议1.5-2.0mL，分装时保留10%-20%空间防冻胀破裂。

　　样本处理‌

　　细胞样本需调整至对数生长期(活力>95%)，与冻存液(如10% DMSO+90% FBS)混合均匀。

　　菌种样本需与保护剂(如10%甘油)配制成悬液，浓度控制在10⁸-10¹⁰个/mL。

　　二、‌分装与标记‌

　　无菌分装‌

　　在超净台中操作，避免污染;分装后立即拧紧管盖，确保密封性。

　　信息标记‌

　　使用激光雕刻或耐低温标签，标注样本名称、日期、操作者等关键信息。

　　三、‌程序降温‌

　　梯度冷冻‌(推荐)

　　4℃平衡30分钟 → -20℃保持2小时 → -80℃预冷4小时 → 转移至液氮气相区(-150℃)过渡1小时。

　　快速冷冻‌

　　使用程序降温盒(如Mr. Frosty)，以-1℃/min速率直接降至-80℃。

　　四、‌液氮存储规范‌

　　存储模式‌

　　气相存储‌(-150℃~-190℃)：适合频繁存取，温度波动小。

　　液相存储‌(-196℃)：长期保存选择，需严格密封防液氮渗入。

　　安全措施‌

　　冻存管需装入冻存盒或纱布袋，避免直接接触液氮。

　　液氮罐需定期检查液位(保持≥1/3容量)。

　　五、‌复苏操作‌

　　快速解冻‌

　　从液氮中取出后立即置入37℃水浴，轻柔摇动1-2分钟至融化。

　　离心去保护剂‌

　　将细胞悬液转移至离心管，加入培养基离心后弃上清，重悬接种。

　　六、‌风险控制‌

　　防爆管‌：选用高质量内旋盖冻存管，避免直接浸入液相液氮。

　　防护装备‌：操作时穿戴低温手套、护目镜，防止冻伤或爆管伤害。

　　(注：长期存储样本建议每5年检测活性。)

　　天津本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。