Elisa实验：如何判断酶标板是否失效?

　　Elisa实验：如何判断酶标板是否失效?

　　以下是天津本生判断酶标板是否失效的全面检测方法及标准，涵盖物理检查、功能测试和实验验证：

　　一、‌物理检查‌

　　外观检测‌

　　观察板孔是否有划痕、变形或污染，破损的板孔会导致液体分布不均。

　　检查密封性：未密闭保存的酶标板可能因吸附水分或干燥失效。

　　透光率测试‌

　　用酶标仪检测空板吸光度(主波长450nm，参考波长630nm)，若透光率不均(CV值>10%)提示板子性能下降。

　　二、‌功能验证‌

　　蛋白吸附能力测试‌

　　包被50μg/mL IgG过夜，BCA法检测吸附前后蛋白浓度差，吸附量下降>20%表明板子失效。

　　空白值检测‌

　　加入缓冲液后测OD值，空白孔OD>0.2(夹心法)提示非特异性吸附增加。

　　三、‌实验验证‌

　　标准曲线测试‌

　　使用已知浓度标准品检测，若线性相关系数(R值)<0.99或梯度显色异常，提示板子失效。

　　复孔CV值>8%表明板孔间一致性差。

　　显色反应验证‌

　　正常TMB底物显色应为蓝色→黄色(终止后)，若显色延迟或颜色异常需更换板子。

　　四、‌保存条件追溯‌

　　商品化板需4℃密闭保存，自包被板有效期更短;若长期暴露于高温或湿度>60%环境，建议弃用。

　　五、‌操作对照‌

　　同步使用新板对比检测，若旧板结果偏差>15%则判定失效。

　　通过以上方法可综合评估酶标板状态，失效板需及时更换以避免实验误差。

　　注：以上资料仅供参考，如需更详细说明，可参考具体品牌商附带产品信息。

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