小鼠乙酰胆碱elisa试剂盒怎么用?

　　小鼠乙酰胆碱elisa试剂盒怎么用?

以下是小鼠乙酰胆碱(ACH)ELISA试剂盒的标准操作流程及注意事项，综合整理：

一、试剂盒使用前准备‌

试剂平衡‌

从冷藏环境中取出试剂盒，室温(20-25℃)平衡15-30分钟后再使用‌。

样本处理‌

血清/血浆样本避免反复冻融，短期保存于4℃，长期保存于-20℃或-70℃‌。

组织样本可用生理盐水稀释(推荐1:3比例)‌。

二、详细操作步骤‌

加样‌

设置空白孔(不加样本和酶标试剂)、阴性/阳性对照孔(各2孔)‌。

待测样本孔先加40μl样品稀释液，再加10μl样本，轻晃混匀‌。

温育‌

37℃避光孵育30分钟，封板膜密封‌。

洗涤‌

弃去液体，每孔加满洗涤液(浓缩液需30倍稀释)，静置30秒后倒弃，重复5次，拍干‌。

显色与终止‌

每孔加显色剂A和B各50μl，37℃避光显色15分钟‌。

加终止液50μl，蓝色立即转为黄色‌。

读数‌

450nm波长测定OD值，需在加终止液后15分钟内完成‌。

三、关键注意事项‌

试剂使用‌

不同批号试剂不可混用‌。

浓缩洗涤液结晶时可水浴加热助溶‌。

实验误差控制‌

加样时间控制在5分钟内，推荐使用排枪‌。

显色剂需避光保存‌。

数据计算‌

若样本OD值超出标准曲线范围，需稀释后重测(计算时乘以稀释倍数)‌。

出现负值可能因样本浓度过低，需验证样本处理方式‌。

四、常见问题解答‌

样本稀释‌：组织样本可用生理盐水，稀释比例1:3‌。

结果异常‌：OD值过低可能与样本处理、稀释或操作有关‌。

试剂盒容量‌：96T试剂盒可检测约85个样本(含标准品和对照孔)‌。

如需进一步了解实验原理或故障排除，可参考试剂盒配套说明书‌。

注：以上资料仅供参考，具体请咨询品牌供应商或技术老师。

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