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qPCR实验板:40ul全裙边384孔PCR板透明加白色
本是详细解析一下“40ul 全裙边 384孔 PCR板 透明加白色"的含义、特点和应用。这通常指的是一种专为高通量实时荧光定量PCR(qPCR)设计的微孔板。
一、解析
40ul:
指每个孔的最大推荐工作容积。这意味着每个孔可以安全地容纳最多40微升的反应体系。
实际使用时,常见的反应体积在10-20μl之间(为了降低成本和避免蒸发),但板子的设计保证了即使加到40μl也不会溢出或难以密封。
它也暗示了孔的设计容积(可能为50-60μl甚至更大),以确保有足够的空间。
全裙边 :
裙边是指PCR板四周的突出边缘。
全裙边意味着裙边是完整且带有机械加工孔的。这是最高规格的裙边设计。
优点:
机械强度:不易弯曲变形,在自动化处理中至关重要。
自动化兼容性:边缘的孔可以与自动化工作站(机械臂)的定位销匹配,实现精确定位和抓取,减少误差。
更好的密封性和稳定性:为热封或压盖提供更坚固的支撑。
384孔:
指板的规格。标准384孔板有16行 x 24列,孔数是一般96孔板的4倍。
优点:通量,显著降低单个样本的试剂成本和耗材成本(因为反应体积更小),节省仪器运行时间和实验室空间。
缺点:对移液操作精度要求高,通常需要依赖384通道的电子移液器或自动化液体处理工作站。
透明加白色:
这是指板的材质和光学设计,是qPCR应用的核心关键。
白色板体:板的基座和孔壁是白色的。白色是一种高反射材料,其作用是将反应中产生的荧光信号高效地反射回孔的上方,以便被仪器的光学检测器捕获。
优点:极大提高荧光信号强度,减少孔与孔之间的信号串扰,提升数据的灵敏度和准确性。特别适合多重荧光检测和低丰度基因的定量。
透明盖/透明孔:通常指板盖是光学透明的,或者孔壁虽然是白色但底部非常薄且透明。
优点:透明的盖子允许qPCR仪的光学系统从上方无障碍地读取每个孔的荧光信号。透明的孔底则允许进行终点PCR后的凝胶电泳分析(无需转板),但这不是主要功能。
这种“透明盖+白色孔"的组合是目前高性能qPCR的黄金标准,在信号强度和信噪比之间取得了最佳平衡。
二、主要特点与优势总结
高通量:384孔设计,一次运行最多处理384个样本(通常包括标准曲线、复孔等)。
高灵敏度与高精度:白色孔壁荧光收集效率,孔间串扰,提供优异的qPCR数据质量。
自动化兼容性:全裙边设计使其适配各类液体处理机器人和高通量筛选平台。
热学性能优异:通常由聚丙烯(PP)制成,导热快,保证孔间温度均一性,提升扩增效率一致性。
三、主要应用场景
超高通量基因表达分析(RNA-Seq验证、大规模样本筛查)。
药物基因组学与基因分型。
病原体大规模检测。
下一代测序(NGS)文库的质控:对构建好的文库进行qPCR定量。
任何需要处理大量样本,并且对数据精密度和准确性要求的qPCR实验。
四、使用注意事项
仪器兼容性:务必确认您的qPCR仪支持384孔板运行(例如:ABI QuantStudio 5/6/7, Bio-Rad CFX384, Roche LightCycler 480等)。
密封方式:
光学透明粘性封板膜:需用压板器确保密封均匀,防止蒸发。
透明硬质盖板:有些系统使用可重复使用的硬质盖板。
液体操作:强烈建议使用电子移液器或自动化工作站进行分液,以确保精度和可重复性,并保护操作者免受重复性劳损(RSI)。
实验设计:由于孔数多,更容易产生边缘效应(边缘孔蒸发更快),需要在实验布局时加入更多的技术重复和对照,并使用ROX等被动参比染料来校正孔间差异。
注:以上资料仅供参考,不作为实际数据,如需具体产品资料请咨询技术老师或品牌商。
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