ELISA板的基本使用流程

　　ELISA板的基本使用流程

　　ELISA板(酶标板)是ELISA实验的核心载体，其使用需遵循标准化操作流程，主要包括以下步骤：

　　板条拆装与保存‌

　　使用可拆卸酶标板时，轻推底部拆下所需板条，剩余板条需密封后4℃保存(避免干燥失效)‌。

　　未使用的板条应连同干燥剂放回铝箔袋，密封保存于4℃冰箱‌。

　　样本与标准品处理‌

　　样本需离心(4℃, 1000g, 5分钟)去除杂质，标准品需稀释为梯度浓度(如1:2倍比稀释)‌。

　　加样时每孔100μL，悬空加入避免气泡，不同浓度需更换枪头‌。

　　孵育与洗涤‌

　　加样后37℃避光孵育90分钟，孵育时间需严格控制‌。

　　洗涤时每孔加入300μL洗涤液，浸泡30秒后拍干，重复3-5次以减少背景信号‌。

　　显色与检测‌

　　加入底物(如TMB)避光孵育15分钟，终止反应后立即用酶标仪450nm检测OD值‌。

　　关键注意事项

　　封闭‌：包被后需用BSA或脱脂奶粉封闭非特异性结合位点，减少假阳性‌。

　　温度控制‌：孵育温度需稳定(37℃)，避免温度波动影响结合效率‌。

　　洗涤‌：洗涤不充分会导致高背景值，建议使用洗板机或手动拍干‌。

　　常见问题与优化

　　板条选择‌：优先选用聚苯乙烯材质微孔板，吸附性能稳定且空白值低‌。

　　加样技巧‌：避免加在孔壁上部，防止液体残留影响结果‌。

　　重复性‌：建议设置复孔(至少3次重复)以提高数据可靠性‌。

　　如需更详细的视频操作演示，可参考ELISA实验教程‌。

　　注：仅供科研使用，以上资料供参考，如需具体产品说明请咨询技术老师或品牌供应商。

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