PCR、qPCR与dPCR技术对比

　　PCR、qPCR与dPCR技术对比

　　PCR(聚合酶链式反应)、qPCR(荧光定量PCR)和dPCR(数字PCR)是分子诊断中常用的核酸扩增技术，三者核心差异在于检测原理、定量能力及应用场景。

　　1. 原理与检测方式‌

　　普通PCR‌：

　　通过变性、退火、延伸循环扩增目标DNA，终点通过电泳定性分析产物‌。

　　仅能判断目标序列“有无"，无法定量‌。

　　qPCR(荧光定量PCR)‌：

　　在PCR体系中加入荧光染料或探针，实时监测扩增过程，通过Ct值(阈值循环数)定量初始模板量‌。

　　可区分绝对定量(需标准曲线)和相对定量(如基因表达分析)‌。

　　dPCR(数字PCR)‌：

　　将样本分割为微滴或微孔，独立扩增后统计阳性/阴性比例，直接计算绝对拷贝数，无需标准曲线‌。

　　2. 定量能力与灵敏度‌

　　技术 定量范围 灵敏度 适用场景

　　PCR 定性/半定量 低(依赖电泳) 基因克隆、病原体初筛‌

　　qPCR 相对/绝对定量 高(Ct值) 基因表达、病原体定量‌

　　dPCR 绝对定量 高(单分子) 稀有突变检测、低丰度样本‌

　　3. 优缺点对比‌

　　PCR‌：

　　优点：成本低、操作简单。

　　缺点：无法定量，易污染(需开盖检测)‌。

　　qPCR‌：

　　优点：实时监测、自动化高、灵敏度好‌。

　　缺点：依赖标准曲线，扩增效率影响准确性‌。

　　dPCR‌：

　　优点：无需标准曲线，抗抑制剂能力强‌。

　　缺点：设备昂贵，通量较低。

　　4. 应用场景选择建议‌

　　定性检测‌(如病原体筛查)：普通PCR‌。

　　基因表达分析‌：qPCR(相对定量)‌。

　　绝对定量需求‌(如肿瘤基因突变)：dPCR‌。

　　总结‌：qPCR是PCR的升级版，实现定量分析;dPCR进一步突破定量精度限制，但成本更高。选择时需权衡检测需求与预算‌。

　　注：仅供科研使用，以上资料供参考，如需具体产品说明请咨询技术老师或品牌供应商。

　　荧光定量pcr 天津本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。本生试剂盒