酶联免疫吸附实验(ELISA)的种类及原理

　　酶联免疫吸附实验(ELISA)的种类及原理

　　酶联免疫吸附实验(ELISA)是一种基于抗原-抗体特异性结合和酶催化显色的高灵敏度检测技术，广泛应用于生物医学研究和临床诊断‌。其核心原理是通过固相载体(如聚苯乙烯微孔板)固定抗原或抗体，结合酶标记的抗体/抗原，通过显色反应实现目标物质的定性与定量分析‌。

　　一、ELISA的主要类型及原理‌

　　直接ELISA‌

　　原理‌：抗原直接包被在固相载体上，加入酶标记的一抗直接检测目标抗原‌。

　　特点‌：操作简单，但灵敏度较低(1-10 ng/mL)，适用于高丰度抗原检测(如病毒颗粒、纯化蛋白)‌。

　　间接ELISA‌

　　原理‌：先包被抗原，加入一抗后，再通过酶标记的二抗放大信号‌。

　　特点‌：信号强度提升5-10倍，灵敏度达0.1-1 ng/mL，适用于抗体检测(如传染病诊断、疫苗接种效果评估)‌。

　　夹心ELISA‌

　　原理‌：使用两种抗体(捕获抗体和检测抗体)夹心结合目标抗原，酶标记检测抗体显色‌。

　　特点‌：灵敏度最高(0.01-0.1 ng/mL)，适用于复杂样本中的微量蛋白(如细胞因子、肿瘤标志物)‌。

　　竞争ELISA‌

　　原理‌：样本抗原与标记抗原竞争结合有限抗体，信号强度与样本抗原浓度成反比‌。

　　特点‌：适用于小分子检测(如激素、药物)，灵敏度达0.001-0.01 ng/mL‌。

　　二、ELISA的通用原理‌

　　固相包被‌：抗原或抗体吸附于固相载体(如96孔板)，保持免疫活性‌。

　　酶标记‌：抗体或抗原与酶(如HRP、AP)偶联，保留免疫活性和酶活性‌。

　　显色检测‌：酶催化底物(如TMB)生成有色产物，通过比色法定量‌。

　　三、应用场景对比‌

　　类型 适用目标 典型应用场景

　　直接ELISA 高丰度抗原 病毒检测、纯化蛋白定量‌

　　间接ELISA 抗体 HIV抗体筛查、疫苗接种评估‌

　　夹心ELISA 微量蛋白 细胞因子(IL-6)、肿瘤标志物‌

　　竞争ELISA 小分子(激素/药物) 药物监测、过敏原检测‌

　　四、技术优化方向‌

　　灵敏度提升‌：夹心法通过双抗体结合减少干扰，竞争法优化小分子检测特异性‌。

　　操作简化‌：直接法步骤减少50%，适合高通量筛选‌。

　　注：仅供科研使用，以上资料供参考，如需具体产品说明请咨询技术老师或品牌供应商。

　　酶联免疫吸附实验 天津本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。本生试剂盒