如何正确使用qPCR封板膜?

　　如何正确使用qPCR封板膜?

一、qPCR封板膜的正确使用方法

准备工作‌

从无酶自封袋中取出单张封板膜，避免手直接接触粘合面‌。

若使用带标签的封板膜，需沿切线缓慢剥离衬纸，减少卷曲风险‌。

贴合步骤‌

将封板膜一端对齐孔板边缘，逐步贴合并拉紧另一端，确保无褶皱‌。

使用压膜板(或光滑卡片)以“十字交叉”方式刮压：先水平方向两次，再垂直方向两次，确保孔间和边缘均密封‌。

密封检查‌

确认封板膜与孔板紧密贴合，无液体残留或气泡，边缘无翘起‌。

密封后静置10分钟，使粘合剂充分固化‌。

二、关键注意事项

避免漏液‌：96孔板可能存在公差变形，需多次刮压确保密封性‌。

荧光兼容性‌：选择高透光率(≥86%)的聚酯纤维或聚烯烃材质，减少信号干扰‌。

温度耐受‌：确保封板膜耐热性覆盖qPCR循环温度(如-20℃~120℃)‌。

三、常见问题解决

信号弱‌：检查封板膜是否与qPCR仪光路匹配(如白色耗材增强反射)‌。

蒸发率高‌：优先选择压敏型封板膜，蒸发率需≤3%(尤其小体系样本)‌。

通过规范操作和适配性选择，可显著提升qPCR结果的重复性和准确性‌。

注：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

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