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封板膜和预包被抗体微孔板吸收
封板膜与预包被抗体微孔板的吸附特性分析
一、封板膜的功能特性
物理屏障作用
防止液体蒸发和交叉污染,维持37℃孵育时的湿度平衡
材质需具备耐高温性(可耐受≥80℃)和化学稳定性(抗有机溶剂腐蚀)
吸附控制要求
低蛋白吸附表面设计(如聚丙烯材质)可减少非特异性结合
封板膜与微孔板边缘需紧密贴合,避免气泡残留影响温育均匀性
二、预包被抗体微孔板的吸附机制
固相基质选择
高结合力聚苯乙烯微孔板(如MaxiSorp)通过疏水作用被动吸附抗体
蛋白A/G/L包被板通过Fc区或轻链特异性结合抗体,实现定向固定
包被工艺关键参数
抗体浓度通常为1-10 μg/mL,包被缓冲液pH 9.6(碳酸盐缓冲液)优化吸附效率
4℃过夜孵育可形成单层抗体覆盖,避免空间位阻影响抗原结合
三、质量控制要点
批间一致性验证:通过人IgG标准品(10 ng/mL)检测板间CV值应<10%
非特异性控制:封闭液推荐3% BSA/PBS,封闭时间≥1小时
注:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 Elisa试剂盒
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