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粘性定量封板膜介绍及操作
粘性定量封板膜是专为实时荧光定量PCR(qPCR)实验设计的高精度耗材,其核心特点为一次性贴附不可调整,需严格遵循操作规范以确保实验准确性。以下是详细介绍及操作方法:
一、核心特性与功能
黏性定量设计
采用特殊压敏胶涂层,贴附后需一次完成,不可重复调整,避免胶残留影响荧光检测。
定量密封性可控制反应液蒸发率(通常≤3%),尤其适合小体系样本。
光学性能
高透光率(>95% @ 400-700nm),适配主流qPCR仪光路,确保荧光信号无衰减。
低自发荧光背景,提升检测灵敏度和信噪比。
密封与兼容性
耐温范围覆盖qPCR循环(-20℃~120℃),高温下不翘边、不破裂。
适配聚丙烯材质PCR板,避免抑制反应或溶解有害物质。

二、操作步骤与注意事项
1. 准备工作
从无酶自封袋中取出单张封板膜,避免手直接接触粘合面。
若为单端标签设计(如96551),需沿切线缓慢剥离衬纸,锚定一端后逐步贴附,消除卷曲风险。
2. 贴合与压膜
将封板膜一端对齐孔板边缘,逐步拉紧贴附,确保无褶皱。
使用压膜板(或光滑卡片)以“十字交叉"方式刮压:先水平两次,再垂直两次,确保孔间和边缘密封。
3. 检查与固化
确认封板膜与孔板紧密贴合,无气泡或液体残留,边缘无翘起。
密封后静置10分钟,使粘合剂充分固化,增强密封性。
关键注意事项:
不可重复调整:贴附后需一次完成,避免胶残留干扰荧光信号。
避免污染:操作时戴手套,防止粘合面接触污染物。
适配性验证:确认封板膜与qPCR仪光路匹配(如白色耗材增强反射)。
三、常见问题解决
信号弱:检查封板膜是否与仪器光路匹配,或选择高透光率材质。
蒸发率高:优先选择压敏型封板膜,确保蒸发率≤3%。
通过规范操作和适配性选择,可显著提升qPCR结果的重复性和准确性。
注:以上仅供参考,本试剂仅供科研使用,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。
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