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如何确保ELISA实验的重复性?
一、标准品处理与加样规范
标准品处理:冻干标准品需用配套稀释液复溶,涡旋混匀后梯度稀释(如640pg/ml至0pg/ml),避免反复冻融。
加样规范:
使用校准移液器,加样时吸头贴壁45°缓慢注入,避免气泡和液体挂壁。
控制加样速度(5分钟内完成),复孔间误差<5%。
二、孵育控制与洗涤优化
孵育控制:37℃恒温孵育,封板膜密封防止蒸发,震荡仪辅助混匀。
洗涤优化:
洗涤液现配现用(1:20稀释),每孔注满后静置30秒,重复5次。
拍干时避免残留,边缘孔需重点检查。
三、封闭加强与试剂平衡
封闭加强:1% BSA或明胶封闭1.5小时,减少非特异性结合。
试剂平衡:
试剂盒室温平衡15-30分钟,底物避光保存。
酶标板开封后密封袋保存,防止受潮。
四、样本处理与移液校准
样本处理:
血清样本离心后分装,避免反复冻融;高浓度样本需预稀释。
溶血或脂血样本需超滤处理。
移液校准:每月校准移液器,加样前检查密封性。
五、温育记录与批次管理
温育记录:使用定时器控制孵育时间,避免人为误差。
批次管理:
不同批次试剂禁止混用,标记开瓶日期。
质控样本(如阳性对照)每板必设。
通过以上措施可显著提升ELISA实验的重复性,确保结果稳定可靠。
注:本产品仅供科研使用,不作为实验依据。具体操作请以实际试剂盒说明书为准。
天津本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标,本生,您信任的合作伙伴! 本生试剂盒
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