24孔板细胞培养小室有哪些常见问题

　　24孔板细胞培养小室有哪些常见问题

　　24孔板Transwell实验的门道，但实际操作中总会遇到些小状况。

　　一、细胞接种与生长问题

　　细胞生长不均或局部死亡‌

　　现象‌：换液后部分孔细胞死亡，形成"半圆分界线"。

　　原因‌：培养箱架子不水平导致液体分布不均;培养基温度过低(如直接从4℃冰箱取出)造成冷休克。

　　解决‌：确保培养箱水平;将培养基提前在37℃培养箱平衡15-30分钟。

　　细胞分布不均

　　现象‌：接种后细胞聚集在孔边缘，细胞稀疏。

　　原因‌：加液方式不当导致液体表面张力效应; 培养基体积不足形成弯液面。

　　解决‌：使用多道移液器均匀加液;确保每孔加液量充足(通常500-650μL)。

　　二、Transwell小室操作问题

　　气泡产生‌

　　现象‌：小室放入下室时产生气泡，影响趋化梯度。

　　解决‌：放置后若见气泡，用镊子轻提小室去除，再放回。

　　基质胶铺板问题‌

　　现象‌：铺胶后胶体不均匀或凝固不良。

　　解决‌：Matrigel基质胶用无血清培养基按1:8比例稀释，取60μL均匀铺于上室，37℃孵育1-4小时。

　　三、污染与蒸发问题

　　现象‌：培养物污染或液体蒸发。

　　原因‌：培养板盖子较松，利于气体交换但增加污染和蒸发风险。

　　解决‌：保持培养箱内清洁，放置无菌水槽维持湿度100%。

　　四、其他常见问题

　　细胞状态不佳‌：接种前细胞应处于对数生长期，活力良好。

　　培养时间不当‌：根据细胞类型优化时间。

　　换液操作不当‌：在通风橱内换液时，关闭风机或逐孔操作，避免气流导致培养基快速蒸发。

　　注：供科研使用，以上资料供参考，不作为实验依据，具体请咨询技术老师是或品牌商。

　　24孔板细胞培养小室 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。