小鼠骨成型蛋白2（BMP-2）检测ELISA试剂盒操作步骤

小鼠骨成型蛋白2（BMP-2）检测ELISA试剂盒操作步骤

结合ELISA实验常见问题、封板膜使用等相关信息，以下是小鼠骨成型蛋白2（BMP-2）检测ELISA试剂盒的标准操作步骤，全程适配科研实验场景：

一、实验前准备

试剂与样本预处理‌

试剂盒从2-8℃冰箱取出，室温平衡20-30分钟，20×浓缩洗涤液按1:20比例用蒸馏水稀释备用。

血清/血浆样本采集后30分钟内1000g离心20分钟，取上清，避免反复冻融，溶血样本不可使用。

标准品用标准品稀释液溶解，倍比稀释成5个以上梯度浓度，现配现用。

器材准备‌

提前准备450nm波长酶标仪、高精度移液器、37℃恒温箱、蒸馏水等器材。本生BUNSEN

二、正式操作流程

加样‌

设置标准品孔、待测样本孔和空白孔，标准品孔各加不同浓度标准品50μL，样本孔加待测样本50μL，空白孔不加。

除空白孔外，每孔加入HRP标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，避免蒸发和污染。

温育‌

将酶标板放入37℃恒温箱，温育60分钟，保证抗原抗体充分结合。

洗板‌

揭掉封板膜，弃去孔内液体，拍干，每孔加满洗涤液，静置1分钟后甩干，重复洗板5次，最后在吸水纸上拍干。

显色‌

每孔依次加入显色剂A 50μL、显色剂B 50μL，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。

终止与读数‌

每孔加入终止液50μL，此时蓝色反应液立即转为黄色。本生BUNSEN

以空白孔调零，加终止液后15分钟内，在450nm波长下依次测定各孔的吸光度（OD值）。

三、结果计算

以标准品的OD值为纵坐标，对应标准品浓度为横坐标，绘制标准曲线，得到直线回归方程。

将待测样本的OD值代入回归方程，计算出对应样本中小鼠BMP-2的实际浓度。

四、关键注意事项

所有标准孔和样本孔建议设置复孔，每次实验同步绘制标准曲线，保证结果重复性。

洗涤步骤是核心，洗涤不充分会导致背景偏高、OD值异常升高，可适当增加洗板次数降低误差。

本试剂盒仅用于科研实验，不可用于临床诊断用途。

注：以上科研产品资料仅供参考！

本生BUNSEN一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生！您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。