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细胞爬片的操作方法以及技巧!

发布时间:2022-10-13    点击次数:91

  细胞爬片的操作方法以及技巧!


  在医学生物研究中,免疫荧光检测等需用到细胞爬片。现有的细胞爬片多采用表面平整、光滑的透明玻璃玻片。但在做免疫荧光检测时,为了节约抗体,需免疫组化笔在爬片上进行范围的圈定,将抗体加入划定区域,免疫组化笔中的疏水成分阻滞抗体溢出所圈定的范围,从而达到节约抗体的目的。细胞爬片是细胞培养中比较经常会用到的,现将自己操作的一些方法与技巧拿与大家分享。

  细胞爬片的特点:

  1.玻片表面经过TC处理,双面均可使用。

  2.γ射线灭菌,保证无菌。

  3.使用便捷,只需打开包装,将爬片放入孔板内,将细胞悬液滴到爬片上即可培养。

  4.爬片厚度为0.17mm,直径为8mm/14mm/20mm/25mm.分别适用于48孔细胞培养板/24孔细胞培养板/12孔细胞培养板/6孔细胞培养板。

  5.吸附:该玻片表面具有阳离子电荷,可以通过静电作用吸附冰冻切片组织或细胞,使之粘附在玻片上,进而在玻璃和切片组织之间形成共价键.因此,无需粘黏剂或者蛋白包被,该玻片也能牢固的粘附切片或细胞。

  爬片的准备:

  1、爬片可用一般的盖玻片,也可用专用爬片;

  2、应用盖玻片,可根据自己的需要剪裁成合适的大小,以备置于6孔板、12孔板或24孔板;

  3、将剪裁好的爬片,置于浓硫酸中浸泡并过夜,第二天先用自来水冲洗20遍,再用三蒸水冲洗3遍(个人认为主要目的是冲洗干净就可以了),放在饭盒或者培养皿(一定是玻璃的哦,要不然就……)中烘干后进行高压消毒。

  培养板的准备:

  1、泡酸过夜

  2、冲洗,烘干(1、2步骤与前大致相同)

  3、放入超净工作台用紫外线照1~2小时就可以用了(在照之前可以将爬片一并放入,若细胞贴壁能力不强,可经多聚赖氨酸浸片后放入。贴壁能力强的话,就可以省略了,进行紫外线消毒)

  注:此步自己的经验是爬片可以先浸入消毒后的PBS内,紧接着放入培养板内。目的:浸过PBS的爬片依靠表面的液体,可以用培养板孔底贴和紧密,以利于细胞长到爬片上。(自己刚开始做的时候,经常就是细胞全都长在了爬片与培养板之间,爬片上细胞罕见。)

  细胞爬片:

  1、胰酶消化细胞后计数

  2、根据自己的需要选择合适的细胞密度种入培养板内即可

  3、第二天即可进行干预措施

  细胞爬片的操作方法以及技巧!先和大家介绍到这,如果想要了解更多细胞爬片的信息,可以关注天津本生,本生生物医药客户提供生物实验室检测试剂及耗材,欢迎广大客户来询。


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