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天津本生详解甘油三酯(TG)检测试剂盒

更新时间:2022-11-22    点击次数:541

甘油三酯(TG)检测试剂盒 

PS1087 甘油三酯(TG)检测试剂盒 GPO-PAD单试剂微板法 (psaitong)保存条件:-20℃ 避光 6个月
产品简介

甘油三酯(Triglyceride,TG)又称三酰甘油,是3分子长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,是人体内含量最多的脂类,大部分组织均可以利用甘油三酯分解产物供给能量,同时肝脏、脂肪等组织还可以进行甘油三酯的合成,用酶学方法测定 TG 是生化检测中的常用方法, 其特点是:1、灵敏度、准确度、精密度均高;2、使用温和的反应条件;3、操作简便;4、适用于自动分析仪。
本公司甘油三脂(TG)检测试剂盒(GPO-PAP 单试剂微板法)又称磷酸甘油氧化酶法或磷酸甘油氧化酶-过氧化物酶偶联法等,其原理是甘油三脂被 LPL 水解为甘油和脂肪酸,后者经甘油激酶和 ATP 磷酸化,G-3-P 被磷酸甘油氧化酶(GPO)氧化并产生过氧化氢,再经过氧化物酶(POD)催化,使 4-氨基安替比林与酚(三者合称 PAP)反应,生成红色benhun醌亚胺(Trinder 反应),酶标仪在 500~520nm 处进行比色测定,用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织等样本中的甘油三脂含量定量测定。该试剂盒仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。

 组分:

名称规格储存
试剂(A): GPO-PAP工作液Good's Buffer 
 
30mL
 
 
-20℃ 避光
LPL、GK、GPO
过氧化物酶(POD)
4-氨基安替比林
对氯酚
试剂(B): Glycerol 标准(1.7mmol/L)1mL4℃ 避光
试剂(C): ddH2O1mLRT

 
自备材料:

1、生理盐水或PBS。
2、96 孔板或离心管、小试管。
3、水浴锅或恒温箱。
4、酶标仪或分光光度计。
5、全自动或半自动生化分析仪。

 
操作步骤(仅供参考)

一、样本处理
1、血清、血浆、脑脊液样本:从待测样本中分离出的血清或血浆不应有溶血,直接检测,如超过线性范围,用生理盐水稀释后检测。
2、细胞样本
a:取适量的细胞(一般推荐>106以上),1000g离心10min,弃上清,留取沉淀。
b:.用 PBS 或生理盐水清洗 1-2 次,1000g离心10min,弃上清,留取沉淀。
c:加入200-300μl 的PBS或生理盐水匀浆,冰浴条件下超声破碎细胞,功率300W,每次3-5s,间隔30s,重复3-5次;亦可手动匀浆,制备好的匀浆液不可离心;亦可用1-2% Triton X-100 冰浴 30-60min,制备好的裂解液不可离心。
3、组织样本:准确称取适量组织样本,按质量(g):生理盐水或PBS(mL)=1:9的比例,加入生理盐水或PBS,冰浴条件下手动或机械匀浆,2500-3000g 离心10min,取上清待用。
二、酶标仪TG测定操作:
1:按下表依次加入试剂:
加入物(μL)空白孔标准孔待测孔
ddH2O3--
Glycerol 标准(1.7mmol/L)-3-
待测样本--3
GPO-PAP 工作液300300300
2:充分混匀, 37℃水浴中孵育5min。
3:酶标仪测定 500-520nm 吸光度,以空白孔调零,读取标准孔和各待测孔的吸光度。
三、分光光度计(1ml 比色杯)、半自动生化分析仪 TG 测定操作:
1、按下表依次加入试剂:
加入物(mL)空白管标准管待测管
ddH2O0.01--
Glycerol 标准(1.7mmol/L)-0.01-
待测样本--0.01
GPO-PAP 工作液111
2、充分混匀, 37℃水浴中孵育5min。
3、分光光度计测定500-520nm吸光度,空白管调零,读取标准管和各待测管的吸光度。
四、普通分光光度计(2mL比色杯)TG 测定操作:
1、按下表依次加入试剂:
加入物(mL)空白管标准管待测管
ddH2O0.02--
Glycerol 标准(1.7mmol/L)-0.02-
待测样本--0.02
GPO-PAP 工作液222
2、充分混匀, 37℃水浴中孵育5min。
3、分光光度计测定500-520nm吸光度,空白管调零,读取标准管和各待测管的吸光度。
五、全自动生化分析仪 TG 测定操作:
1、按下表依次加入试剂:
加入物((μL)空白管标准管待测管
ddH2O3--
Glycerol 标准(1.7mmol/L)-3-
待测样本--3
GPO-PAP 工作液300300300
2、充分混匀, 37℃水浴中孵育5min。
3、全自动生化分析仪测定 500-520nm 波长处吸光度,以空白管调零,读取标准管和各待测管的吸光度。

 
机器参数:

主波长/次波长500/600nm
反应类型终点法
反应方向升反应(+)

 
计算公式:

血清、血浆等液体样本(空白调零):
TG(mmol/L)={(待测管吸光度-空白吸光度)/(标准管吸光度-空白吸光度)}×1.7mmol/L
血清、血浆等液体样本(全自动生化分析仪):
TGmmol/L)=(待测管吸光度/(标准管吸光度)×1.7mmol/L
细胞、组织等样本(空白调零):
TG(mmol/L)={ ( 待 测 管 吸 光 度 - 空 白 吸 光 度 )/( 标 准 管 吸 光 度 -空 白 吸 光 度 ) }×1.7mmol/L÷待测样本浓度(mg/mL)
细胞、组织等样本(全自动生化分析仪):
TG(mmol/L)=(待测管吸光度/(标准管吸光度)×1.7mmol/L÷待测样本浓度(mg/mL)

 
参考区间:

健康成年人:
理想范围:<1.7mmol/L(<150mg/dl)
边缘升高:<1.7-2.25mmol/L(150-199mg/dl)
升高:<2.26-5.64mmol/L(200-499mg/dl)
很高:≥565mmol/L(≥500mg/dl)

 
性能指标:

外观无色至淡黄色澄清液体
线性范围0.05-9.0mmol/L(4~790mg/dl),R2>0.98
灵敏度检测下限 0.05mmol/L(4mg/dl)
变异系数批内<5%,批间<8%,总误差<10%
空白吸光值<0.2(1cm 光径)
干扰因素胆红素<205μmol/L;血红蛋白<6g/L;EDTA、肝素抗凝时,对结果无明显影响。
稳定性密闭,6个月

 
注意事项:

1、上述低温试剂避免反复冻融,以免失效或效率下降。
2、本法可直接用于检测脑脊液中的TG含量,但不能直接检测尿液中的TG含量,因为未经处理的尿液中含有还原性物质,影响过氧化物酶反应。
3、待测样本如不能及时测定,应置于2-8℃保存,3天内稳定。
4、本法线性范围可达9.0mmol/L,如果样本TG浓度过高,结果可能呈假性降低,应用生理盐水稀释后重测,结果乘以稀释倍数。

 
 

有效期:-20℃ 避光, 6个月有效。

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