天津本生阐述：甘油三酯(TG)检测试剂盒

更新时间：2022-12-13 点击次数：466

甘油三酯(TG)检测试剂盒

PS1087 甘油三酯(TG)检测试剂盒 GPO-PAD单试剂微板法 (psaitong)保存条件：-20℃ 避光 6个月
产品简介

甘油三酯(Triglyceride，TG)又称三酰甘油，是3分子长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子，是人体内含量最多的脂类，大部分组织均可以利用甘油三酯分解产物供给能量，同时肝脏、脂肪等组织还可以进行甘油三酯的合成，用酶学方法测定 TG 是生化检测中的常用方法，其特点是：1、灵敏度、准确度、精密度均高；2、使用温和的反应条件；3、操作简便；4、适用于自动分析仪。
本公司甘油三脂(TG)检测试剂盒(GPO-PAP 单试剂微板法)又称磷酸甘油氧化酶法或磷酸甘油氧化酶-过氧化物酶偶联法等，其原理是甘油三脂被 LPL 水解为甘油和脂肪酸，后者经甘油激酶和 ATP 磷酸化，G-3-P 被磷酸甘油氧化酶(GPO)氧化并产生过氧化氢，再经过氧化物酶(POD)催化，使 4-氨基安替比林与酚(三者合称 PAP)反应，生成红色benhun醌亚胺(Trinder 反应)，酶标仪在 500~520nm 处进行比色测定，用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织等样本中的甘油三脂含量定量测定。该试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

组分：

名称		规格	储存
试剂(A): GPO-PAP工作液	Good's Buffer	30mL	-20℃ 避光
	LPL、GK、GPO
	过氧化物酶(POD)
	4-氨基安替比林
	对氯酚
试剂(B): Glycerol 标准(1.7mmol/L)		1mL	4℃ 避光
试剂(C): ddH2O		1mL	RT

自备材料:

1、生理盐水或PBS。

2、96 孔板或离心管、小试管。

3、水浴锅或恒温箱。

4、酶标仪或分光光度计。

5、全自动或半自动生化分析仪。

操作步骤(仅供参考)：

一、样本处理
1、血清、血浆、脑脊液样本：从待测样本中分离出的血清或血浆不应有溶血，直接检测，如超过线性范围，用生理盐水稀释后检测。
2、细胞样本
a:取适量的细胞(一般推荐＞10⁶以上)，1000g离心10min，弃上清，留取沉淀。
b:.用 PBS 或生理盐水清洗 1-2 次，1000g离心10min，弃上清，留取沉淀。
c:加入200-300μl 的PBS或生理盐水匀浆，冰浴条件下超声破碎细胞，功率300W，每次3-5s，间隔30s,重复3-5次；亦可手动匀浆，制备好的匀浆液不可离心；亦可用1-2% Triton X-100 冰浴 30-60min，制备好的裂解液不可离心。
3、组织样本：准确称取适量组织样本，按质量(g)：生理盐水或PBS(mL)=1：9的比例，加入生理盐水或PBS，冰浴条件下手动或机械匀浆，2500-3000g 离心10min，取上清待用。
二、酶标仪TG测定操作:
1：按下表依次加入试剂：
加入物(μL)	空白孔	标准孔	待测孔
ddH₂O	3	-	-
Glycerol 标准(1.7mmol/L)	-	3	-
待测样本	-	-	3
GPO-PAP 工作液	300	300	300
2：充分混匀, 37℃水浴中孵育5min。
3：酶标仪测定 500-520nm 吸光度，以空白孔调零，读取标准孔和各待测孔的吸光度。
三、分光光度计(1ml 比色杯)、半自动生化分析仪 TG 测定操作：
1、按下表依次加入试剂：
加入物(mL)	空白管	标准管	待测管
ddH₂O	0.01	-	-
Glycerol 标准(1.7mmol/L)	-	0.01	-
待测样本	-	-	0.01
GPO-PAP 工作液	1	1	1
2、充分混匀, 37℃水浴中孵育5min。
3、分光光度计测定500-520nm吸光度，空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度。
四、普通分光光度计(2mL比色杯)TG 测定操作:
1、按下表依次加入试剂：
加入物(mL)	空白管	标准管	待测管
ddH₂O	0.02	-	-
Glycerol 标准(1.7mmol/L)	-	0.02	-
待测样本	-	-	0.02
GPO-PAP 工作液	2	2	2
2、充分混匀, 37℃水浴中孵育5min。
3、分光光度计测定500-520nm吸光度，空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度。
五、全自动生化分析仪 TG 测定操作:
1、按下表依次加入试剂：
加入物((μL)	空白管	标准管	待测管
ddH₂O	3	-	-
Glycerol 标准(1.7mmol/L)	-	3	-
待测样本	-	-	3
GPO-PAP 工作液	300	300	300
2、充分混匀, 37℃水浴中孵育5min。
3、全自动生化分析仪测定 500-520nm 波长处吸光度，以空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度。

机器参数：

主波长/次波长	500/600nm
反应类型	终点法
反应方向	升反应(+)

计算公式：

血清、血浆等液体样本(空白调零)：

TG(mmol/L)=｛(待测管吸光度-空白吸光度)/(标准管吸光度-空白吸光度)｝×1.7mmol/L

血清、血浆等液体样本(全自动生化分析仪)：

TGmmol/L)=(待测管吸光度/(标准管吸光度)×1.7mmol/L

细胞、组织等样本(空白调零)：

TG(mmol/L)=｛ ( 待测管吸光度 - 空白吸光度 )/( 标准管吸光度 -空白吸光度 ) ｝×1.7mmol/L÷待测样本浓度(mg/mL)

细胞、组织等样本(全自动生化分析仪)：

TG(mmol/L)=(待测管吸光度/(标准管吸光度)×1.7mmol/L÷待测样本浓度(mg/mL)

参考区间：

健康成年人：

理想范围：＜1.7mmol/L(＜150mg/dl)

边缘升高：＜1.7-2.25mmol/L(150-199mg/dl)

升高：＜2.26-5.64mmol/L(200-499mg/dl)

很高：≥565mmol/L(≥500mg/dl)

性能指标：

外观	无色至淡黄色澄清液体
线性范围	0.05-9.0mmol/L(4~790mg/dl)，R2>0.98
灵敏度	检测下限 0.05mmol/L(4mg/dl)
变异系数	批内<5%，批间<8%，总误差<10%
空白吸光值	<0.2(1cm 光径)
干扰因素	胆红素<205μmol/L；血红蛋白<6g/L；EDTA、肝素抗凝时，对结果无明显影响。
稳定性	密闭，6个月

注意事项：

1、上述低温试剂避免反复冻融，以免失效或效率下降。

2、本法可直接用于检测脑脊液中的TG含量，但不能直接检测尿液中的TG含量，因为未经处理的尿液中含有还原性物质，影响过氧化物酶反应。

3、待测样本如不能及时测定，应置于2-8℃保存，3天内稳定。

4、本法线性范围可达9.0mmol/L，如果样本TG浓度过高，结果可能呈假性降低，应用生理盐水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。

有效期：

-20℃ 避光， 6个月有效。

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