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本生带您了解、TAE缓冲液与TBE缓冲液的作用区别

更新时间:2023-05-06    点击次数:732

  本生带您了解、TAE缓冲液与TBE缓冲液的作用区别


  分子生物学实验中常用的电泳缓冲液主要有三种:TAE、TBE和TPE。TBE与TPE缓冲容量高,DNA分离效果好,但TPE会导致DNA片段回收时含磷酸盐浓度高,容易使DNA沉淀。TAE缓冲容量低,但价格较便宜,TBE缓冲液含有的EDTA可螯合二价阳离子,可抑制DNase活性,防止PCR扩增产物降解。

  TAE缓冲液的特点:

  TAE是使用泛的缓冲系统。其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量(TBE中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量),且双链线状DNA在其中的迁移率较其他两种缓冲液快约10%,电泳大于13kb的片段时用TAE缓冲液将取得更好的分离效果,此外,回收DNA片段时也易用TAE缓冲系统进行电泳。TAE的缺点是缓冲容量小,长时间电泳(如过夜)不可选用,除非有循环装置使两极的缓冲液得到交换。

  TBE缓冲液的特点:

  TBE 缓冲液也是常用的核酸电泳缓冲盐溶液,主要用于DNA的琼脂糖凝胶电泳。TBE的主要成分是Tris-硼酸盐与EDTA,缓冲能力强,适合较长时间电泳,分辨率较高,电泳小于1kb的片段时分离效果好。TBE 缓冲液中的硼酸成分会影响DNA回收效率以及后续的酶反应,TBE用于琼脂糖凝胶时易造成高电渗作用,并且因与琼脂糖相互作用生成非共价结合的四羟基硼酸盐复合物而使DNA片段的回收率降低,所以不宜在回收电泳中使用。若要进行DNA片段的琼脂糖凝胶电泳回收实验,建议使用TAE 缓冲液。

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