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操作ELISA试剂盒的实验步骤及常见问题汇总

更新时间:2023-05-11    点击次数:2401

  操作ELISA试剂盒的实验步骤及常见问题汇总

 

  ELISA试剂盒实验操作步骤的详细说明:

  1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

  2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

  3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

  4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请*后乘以总稀释倍数(×n×5)。

  5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

  6.底物请避光保存。

  7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

  ELISA试剂盒实验操作的常见问题。

  一、一次ELISA实验需要多长时间?

  双抗体夹心ELISA法一次实验需要3.5-4小时,竞争ELISA法一次实验需要2-2.5小时。

  二、血清样本如何处理?

  全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

  三、血浆样本如何处理?

  建议选择EDTA或者柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,于1000×g离心15分钟,仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

  四、细胞上清液样本如何处理?

  检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(1000×g)。仔细收集上清。

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