操作ELISA试剂盒的实验步骤及常见问题汇总

　　操作ELISA试剂盒的实验步骤及常见问题汇总

　　ELISA试剂盒实验操作步骤的详细说明：

　　1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

　　2.浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

　　3.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

　　4.请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值)，请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定，计算时请*后乘以总稀释倍数(×n×5)。

　　5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

　　6.底物请避光保存。

　　7.严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

　　ELISA试剂盒实验操作的常见问题。

　　一、一次ELISA实验需要多长时间?

　　双抗体夹心ELISA法一次实验需要3.5-4小时，竞争ELISA法一次实验需要2-2.5小时。

　　二、血清样本如何处理?

　　全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

　　三、血浆样本如何处理?

　　建议选择EDTA或者柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，于1000×g离心15分钟，仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

　　四、细胞上清液样本如何处理?

　　检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右(1000×g)。仔细收集上清。

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