实验中微孔板使用常见到的一些问题汇总

　　实验中微孔板使用常见到的一些问题汇总

　　Q1：如何选择微孔板的颜色?

　　1)荧光检测

　　黑色微孔板能吸收光，因此可抑制自发荧光的影响，适用于 GFP、荧光素、Cy3 和 Cy5 等 短半衰期(纳秒～微秒)荧光检测。对于使用半衰期较长(微秒~毫秒)的镧系元素螯合物 等的检测，可使用时间分辨荧光检测法来避免自发荧光影响，通常推荐使用白色微孔板， 但如果检测中存在较大的交叉干扰，则需要使用黑色微孔板。

　　2)发光检测

　　通常使用光反射效率较高的白色微孔板。如需避免交叉干扰，可使用灰白色 、灰色或黑色 微孔板。此外，磷光(指微孔板等物质受到荧光灯等光的照射后蓄存发光的现象)也是造 成背景增强的原因之一。黑色微孔板可抑制这种现象带来的影响。对于白色微孔板，在检 测前将其遮光约 10 分钟以达到暗适应，即可降低磷光影响。

　　Q2：关于边缘效应的问题

　　关于边缘效应的类型与解决方案的信息如下：

　　①温度梯度：可通过在测定前将微孔板的温度预先调整为与检测仪相同的温度来解决。

　　②蒸发：可使用板盖或密封膜来防止蒸发。此外，将培养箱内的湿度设到 100%附近也有帮 助。

　　③针对细胞实验中出现的边缘效应，有报告称在将微孔板放入 37℃的培养箱前，先将微孔 板置于室温下预孵育 1 小时可有助于细胞均匀粘附。

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