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BUNSEN本生Elisa试剂盒实验的技巧及注意事项

更新时间:2023-12-15    点击次数:304

  BUNSEN本生Elisa试剂盒实验的技巧及注意事项


  在操作elisa试剂盒实验前,不少老师会找寻很多的相关实验资料,网上的资料一大堆,然而真正所能够需要用到的技巧和注意也就那几条,熟练的了解并掌握之后再应用到实验中就会简单的多。

  一、加样的经验总结

  加样或加试剂时,请注意在吸取标本/标准品,酶结合物或底物时,个孔与一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的 “预孵育"时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间控制 在10分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。


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  二、孵育的三条必知

  1.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标 板加上盖或覆膜,以避免液体蒸发;

  2.洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;

  3.同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。

  三、ELISA洗涤小技巧

  洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直 接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响*后的酶标仪读数。

  四、反应时间的控制

  加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔 10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。

  五、操作说明

  1.封板膜只做一次性使用。

  2.标本中待测物质含量过高时先将样本稀释一定倍数后再测定,计算时请乘以稀释倍数。

  3.各步加样均使用加样器,并经常校对其正确性,一次加样时间控制在5分钟内(标本数目多的时候,本生推荐使用排枪加样)。

  4.液体标本置4℃保存应小于1周,-20℃或-80℃均应密封保存,-20℃不应超过1个月,-80℃不应超过2个月;标本溶血会影响检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。

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