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品牌 | 其他品牌 | 产地 | 国产 |
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级别 | 其他 |
土壤过氧化物酶(S-POD)活性检测试剂盒(分光光度法)
中文名称:土壤过氧化物酶(S-POD)活性检测试剂盒
储存条件:2-8℃
单位:盒
有效期:6个月
英文名称:Soil Peroxidase(S-POD)Activity Assay Kit
检测方法:可见分光光度法 Spectrophotometer
规格:50T/24S
测定意义:S-POD 主要来源于土壤微生物,能够氧化土壤有机物质产生过氧化物,在腐殖质的形成过程中具有重要作用。
测定原理:S-POD 催化有机物质氧化成醌,后者在430nm 有特征光吸收。
自备用品:可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、ym100mL(不允许快递)、研钵、冰和蒸馏水。
备注:
以上数据均来自公开文献,暂未进行独立验证, 仅供参考。
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 规格 保存条件
试剂一 粉剂×2 瓶 2-8°C保存
试剂二 液体 5 mL×1 瓶 2-8°C保存
试剂三 液体 10 mL×1 瓶 2-8°C保存
试剂四 液体 100 mL×1 瓶(自备) 2-8°C保存
标准品 液体 10 mL×1 瓶 2-8°C保存
溶液的配制:
1、 试剂一:临用前加入 10 mL 蒸馏水,用不完的试剂 2-8°C保存一周;
2、 试剂四:自备ym;
3、 标准品:相当于每 1mL ym相中含有 0.2mg/mL 紫色没食子素。
产品说明:
S-POD主要来源于土壤微生物,能够氧化土壤有机物质产生过氧化物,在腐殖质的形成过程中具有重要作用。
S-POD催化有机物质氧化成醌,后者在430nm有特征光吸收。
Soil organic matter Quinone (430nm)
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、0.5mol/L HCl溶液、1mL玻璃比色皿、30-50目筛、ym不允许快递)、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
新鲜土样自然风干或 37°C烘箱风干,过 30-50 目筛。
二、测定步骤
1、 标准品处理:将标准品用0.5mol/L HCl溶液稀释至0.1、0.08、0.06、0.04、0.02、0.01、0mg/mL,可参考下表。
序号 稀释前浓度(mg/mL) 标准液体积(μL) 0.5 mol/L HCl 体积(μL) 稀释后浓度(mg/mL)
1 0.2 500 500 0.1
2 0.2 400 600 0.08
3 0.2 300 700 0.06
4 0.2 200 800 0.04
5 0.2 100 900 0.02
6 0.2 50 950 0.01
7 - - 1000 0
备注:试验中每个标准管需 1000μL 标准溶液。
2、 标曲测定:分光光度计预热30min以上,调节波长至430nm,0mg/mL管调零,直接测定稀释后各标准管的吸光度,记为A标准。
3、 样本测定:
试剂名称 测定管 对照管
风干土样(g) 0.05 0.05
蒸馏水 - 100
试剂一(μL) 400 400
试剂二(μL) 100 -
震荡混匀,置于30°C水浴锅准确反应1 h
试剂三(μL) 200 200
试剂四(μL) 1750 1750
振荡数次,室温静置30min,用试剂四调零,取1mL上层液于430nm处测定吸光值A,记为A测定管、A对照管。
计算ΔA测定=A测定管-A对照管。每个测定管需设一个对照管。
三、S-POD 活力计算
1、标准曲线的建立
根据标准管的浓度(y,mg/mL)和吸光度A标准(x,A标准),建立标准曲线。根据标准曲线,将ΔA测定(x)带入公式计算测定中样本的浓度y值(mg/mL)。
2、S-POD活力计算
单位的定义:每天每g土样中产生1mg紫色没食子素定义为一个酶活力单位。
S-POD活力(U/g 土样)=y×V提取相÷W÷T=840×y
T:反应时间,1h=1/24d;V提取相:提取相总体积,1.75mL;W:样本质量,0.05g。
注意事项:
每个样本均需做对照管。
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