罗氏LightCycler® 480专用96孔白色PCR板科研应用详解

　　罗氏LightCycler® 480专用96孔白色PCR板是专为罗氏LightCycler® 480 II实时荧光定量PCR系统设计和优化的高性能耗材。其的“白色"设计和制造工艺，使其在qPCR实验中具有的性能，广泛应用于多个科研领域。

　　一、 核心设计特点与优势

　　白色聚丙烯材质：

　　高效光反射：白色孔壁能将激发光和发射光最大限度地向顶部探测器反射，显著提高荧光信号采集效率，降低孔间交叉干扰(Crosstalk)。

　　均一性：确保了孔与孔之间的信号一致性，提高了数据的精确度和重复性，尤其适合进行绝对定量和高通量检测。

　　热传导性：材质与仪器热槽的导热性匹配，确保96个孔的温度高度均一，升降温速率快，保证了PCR扩增效率的一致性。

　　光学平整盖膜：

　　专用的密封箔(封板膜)透光性佳，且能牢固密封，防止实验过程中蒸发和污染，是保证数据准确性的关键。

　　系统兼容性：

　　与LightCycler® 480 II系统的机械臂、光学检测系统和热循环模块无缝集成，实现自动化操作和优性能。

　　二、 主要科研应用领域

　　基于其高灵敏度和高精确度的特点，该PCR板适用于所有对数据质量要求严苛的qPCR应用。

　　1. 基因表达分析

　　应用描述：这是经典的应用。通过SYBR Green或TaqMan探针法，相对定量检测不同样本(如经过药物处理、不同疾病阶段、不同组织部位)中特定mRNA的表达量差异。

　　为何适用：白色板的高灵敏度和低孔间干扰对于检测低丰度表达基因和微小表达差异(如小于2倍的变化)至关重要，能有效降低假阴性和数据变异。

　　2. 病原体检测与微生物定量

　　应用描述：在医学诊断、食品安全、环境监测领域，定量检测样本中的病毒、细菌或真菌的载量。

　　为何适用：高灵敏度使其能够检测极低拷贝数的病原体核酸。精确的定量结果可用于评估感染严重程度、监测治疗效果和疫情监控。

　　3. 基因分型与突变检测

　　应用描述：利用等位基因特异性探针对单核苷酸多态性(SNP)、插入缺失、点突变等进行分型。

　　为何适用：信号分辨能力可以清晰区分不同基因型(如野生型、杂合型、突变纯合型)的荧光信号差异，保证分型结果的准确性和可靠性。

　　4. 高通量筛选

　　应用描述：在药物研发领域，用于筛选影响特定基因表达的化合物或siRNA。通常需要同时处理大量样本。

　　为何适用：96孔格式是高通量筛选的标准平台。其高度的孔间均一性确保了不同处理组之间数据的可比性，消除了因孔板位置不同带来的系统误差。

　　5. 下一代测序验证

　　应用描述：在完成全转录组或全基因组测序后，使用qPCR对关键的差异表达基因或候选变异进行验证。

　　为何适用：qPCR是验证NGS结果的“金标准"。该PCR板提供的高精度数据确保了验证实验的可信度。

　　6. microRNA分析

　　应用描述：检测微小的microRNA分子，其在基因调控中起着关键作用。

　　为何适用：microRNA通常长度短、丰度低，对检测灵敏度要求高。白色板的信号增强效应对此类应用非常有帮助。

　　三、 使用注意事项

　　专用性：该板专为LightCycler® 480 II系统设计，不能用于其他品牌的qPCR仪(如ABI的QuantStudio系列)，因为板子的尺寸、厚度和光学特性不兼容。

　　密封：必须使用罗氏专用的光学封板膜，普通封板膜无法保证光学性能和密封性，可能导致蒸发和信号失真。

　　加样：建议使用多通道移液器或自动化液体工作站进行加样，以确保孔间体积一致，减少误差。

　　质量控制：对于极其精密的实验，可使用ROX等被动参比染料校正孔与孔之间可能存在的微小荧光本底差异。

　　总结：

　　罗氏LightCycler® 480专用96孔白色PCR板并非一个普通的耗材，而是其qPCR系统的重要组成部分。它在需要高灵敏度、高精确度、高重复性以及优异孔间一致性的各种qPCR科研应用中发挥着不可替代的作用，是获得可靠、可发表级别数据的坚实保障。

　　注：以上资料仅供参考，不作为实际数据，如需其他请咨询技术老师或品牌供应商。

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