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什么是超低吸附细胞培养板?
这是一种经过特殊处理的细胞培养耗材,其核心设计目的是最大限度地抑制细胞的贴壁附着,从而便于进行悬浮细胞培养或形成三维细胞聚集体。
一、什么是超低吸附培养板?
普通细胞培养板(如TC处理)的表面是亲水性的,并带有电荷,旨在促进细胞贴壁和生长。而超低吸附(Ultra-Low Attachment, ULA)培养板则恰恰相反:
表面处理:其表面经过一种惰性的水凝胶聚合物(通常是共价键结合的亲水聚合物) 处理。这种材料是电中性的、高度亲水,但生物惰性。
工作原理:这种惰性表面无法提供细胞贴附所需的化学键或电荷相互作用。因此,细胞无法牢固地贴附在板底,而是在培养基中保持悬浮状态,或者与其他细胞相互聚集。
二、主要特点和优势
抑制细胞贴壁:解决了需要细胞保持悬浮状态的研究需求。
促进细胞聚集:由于细胞无法贴壁,它们会彼此寻找并聚集,自发形成3D细胞球状体(Spheroid) 或类器官(Organoid)。
减少细胞分化:对于干细胞研究,贴壁常常会引发不必要的自发分化。使用ULA板可以维持干细胞的未分化状态和多能性。
减少蛋白吸附:其表面同样能有效减少培养介质中蛋白质的吸附,确保培养基成分的稳定性。
模拟体内环境:3D细胞球体能够更好地模拟体内细胞的真实微环境(包括细胞-细胞相互作用、营养和氧气梯度等),比传统的2D贴壁培养能提供更生理相关的实验数据。
三、主要应用领域
ULA培养板在现代生命科学研究中应用极其广泛,尤其是在以下领域:
癌症研究:
肿瘤球体形成:用于研究肿瘤干细胞的自我更新、增殖、耐药性以及侵袭转移机制。
抗癌药物筛选:3D肿瘤球体对药物的反应更接近体内实体瘤,因此筛选结果更具预测性。
干细胞研究:
胚胎干细胞和诱导多能干细胞的悬浮培养:用于大规模扩增或维持其未分化状态。
拟胚体形成:这是干细胞定向分化为三胚层(内胚层、中胚层、外胚层)的关键第一步。
类器官培养:
在特定生长因子的诱导下,单个干细胞或组织 progenitor 细胞可以在ULA板中自组织形成具有空腔结构、多种细胞类型的微小器官(如肠类器官、脑类器官、肝类器官等)。
免疫细胞研究:
用于扩增和培养悬浮生长的免疫细胞,如T细胞、NK细胞等,用于CAR-T、免疫治疗等研究。
毒理学研究:
使用肝细胞球体等模型来评估化合物的肝毒性,比2D模型更准确。
四、与其它培养板的区别
特性 超低吸附(ULA)板 普通贴壁(TC)板 无处理(未涂层)板
表面性质 共价键合水凝胶,亲水、电中性、生物惰性 经处理带负电荷,亲水 通常为疏水的聚苯乙烯表面
细胞行为 细胞不贴壁,形成悬浮聚集体(球体) 细胞紧密贴壁,呈单层生长 细胞贴附能力很弱,但可能不规则贴附,难以形成均匀单层
主要用途 3D球体、类器官、干细胞、悬浮细胞培养 常规贴壁细胞系的培养 有时用于短期培养或某些需要弱贴附的细胞
蛋白吸附 极低 中等 高
五、使用注意事项
轻柔操作:由于细胞处于悬浮或聚集状态,换液、加药等操作需要格外轻柔,避免吸走细胞团。
接种密度:形成球体的细胞接种密度至关重要,它直接决定了最终形成球体的大小和均一性。需要根据实验目的进行优化。
观察与检测:球体的观察最好使用倒置显微镜。进行MTT/CCK-8等检测时,需要选择适用于悬浮细胞的方法。
回收细胞:回收形成的球体通常需要使用移液器 使用特定的酶进行轻微消化分散。
注:以上资料仅供参考,不作为实验依据,具体产品说明请咨询品牌供应商或技术老师。
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