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本生解析竞争法在ELISA中的两种计算方法
竞争法ELISA的两种主要计算方法如下,结合实验规范与数据分析要点:
一、阳性判定值法
计算步骤
先计算阴性对照(NCX)和阳性对照(PCX)的平均吸光度(A值),要求(NCX-PCX)差值≥0.300(如抗HBc检测试剂盒)。
阴性对照A值需满足:≥0.5×NCX且≤1.5×NCX,超出范围需剔除或重测。
阳性判定值公式:
判定值=0.4×NCX+0.6×PCX
若样本A值≤判定值,判为阳性;反之阴性。
适用场景
需严格验证实验有效性(如抗HBc检测)。
二、抑制率法
计算步骤
抑制率公式:抑制率(%)= 阴性对照A值−样本A值
阴性对照A值−样本A值 ×100%
通常以抑制率≥50%为阳性,<50%为阴性。
优势与局限
适用于小分子抗原(如激素、药物)的快速筛查。
需确保阴性对照A值在1.0-1.5之间以保证灵敏度。
三、方法对比
方法 适用对象 关键指标
阳性判定值法 抗体/大分子抗原 需验证(NCX-PCX)差值有效性
抑制率法 小分子抗原(如药物) 抑制率≥50%为阳性
注:实验前需校准仪器,并设置空白对照(Blank)和最大结合对照(B0)以排除干扰。
注:仅供科研使用,以上资料供参考,如需具体产品说明请咨询技术老师或品牌供应商。
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