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人HLA-DR抗体酶联免疫分析试剂盒说明书

简要描述:人HLA-DR抗体酶联免疫分析试剂盒说明书本生生物公司供应:ELISA试剂盒,血清,荧光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量离心管,进口冻存管,细胞培养皿,培养板,培养,吸头,仪器及手套,色谱耗材,针头过滤器。

  • 产品型号:BS-11202
  • 产       地:天津市
  • 更新时间:2021-10-27
  • 访  问  量:990
详细介绍
品牌其他品牌产地国产
级别其他规格96T/48T

 HLA-DR抗体酶联免疫分析试剂盒说明书  

本试剂盒仅供研究使用。  

检测范围:   96T  

6  pg/ml -300 pg/ml

使用目的:  

本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中HLA-DR  抗体含量。  

实验原理 本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人  HLA-DR  抗体水平。用纯化的抗原包被微孔  板,制成固相抗原,往包被单抗的微孔中依次加入  HLA-DR  抗体,再与  HRP  标记的抗原结  合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过*洗涤后加底物  TMB  显色。TMB  在  HRP  酶  的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的  HLA-DR  抗体呈正相关。用酶标仪在  450nm  波长下测定吸光度(OD  值),通过标准曲线计算样品中  人  HLA-DR  抗体浓度。  

试剂盒组成  

1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 ; 2 酶标试剂 6ml×1 瓶
3 酶标包被板 12 孔×8 条 ; 4 样品稀释液  6ml×1 瓶
5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 ; 6 显色剂B 液 6ml×1/瓶
7 终止液 6ml×1 瓶; 8 标准品(48ng/ml)  0.5ml×1 瓶
9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶; 10 说明书 1 份
11 封板膜 2 张; 12 密封袋 1  个
标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能  马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融  

2.不能检测含  NaN3 的样品,因 NaN3  抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。  

操作步骤  

1.  标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀  释。   

40pg/ml   5  号标准品   150μl  的原倍标准品加入  150μl  标准品稀释液   120pg/ml  

4  号标准品   150μl  的 

5  号标准品加入  150μl  标准品稀释液   60pg/ml   3  号标准品   150μl  的  4  号标准品加入  150μl  标准品稀释液   30pg/ml   2  号标准品   150μl  的  3  号标准品加入  150μl  标准品稀释液   15pg/ml   1  号标准品   150μl  的  2  号标准品加入  150μl  标准品稀释液   2.  加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、  待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样  50μl,待测样品孔中先加样品稀释液  40μl然后再加待测样品  10μl(样品最终稀释度为  5  倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽  量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 3.  温育:用封板膜封板后置  37℃温育  30  分钟。  

4.  配液:将  30  倍浓缩洗涤液用蒸馏水  30  倍稀释后备用   5.  洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置  30  秒后弃去,如此  重复  5  次,拍干。   6.  加酶:每孔加入酶标试剂  50μl,空白孔除外。   7.  温育:操作同  3。   8.  洗涤:操作同  5。   9.  显色:每孔先加入显色剂  A50μl,再加入显色剂  B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色   10  分钟. 10.  终止:每孔加终止液  50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。   11.  测定:以空白孔调零,450nm  波长依序测量各孔的吸光度(OD  值)。  测定应在加终止 液后  15  分钟以内进行。 

操作程序总结:

操作程序总结:.png

 

HLA-DR抗体酶联免疫分析试剂盒说明书  

计算 以标准物的浓度为横坐标,OD  值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的  OD  值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与  OD  值计算出标  准曲线的直线回归方程式,将样品的  OD  值入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。  

注意事项  

1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡  15-30  分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未   用完,板条应装入密封袋中保存。  

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。  

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好  控制在  5  分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。  

4.  请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD  值  大于标准品孔第一孔的  OD  值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n  倍)后再测定,计  算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。  

5.  封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。  

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.   8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。  

9.本试剂不同批号组分不得混用。  

保存条件及有效期  

1.试剂盒保存:;2-8℃。  

2.有效期:6  个月

 


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