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ELISA板开封后的保存与避免反复冻融方法ELISA板开封后的保存与避免反复冻融方法1.短期保存(1周内使用)密封保存:开封后剩余板条需立即用铝箔袋或密封袋包裹,并加入干燥剂(如硅胶),置于4℃冰箱保存。避免潮湿:确保密封环境干燥,防止板条受潮导致抗体失效。2.长期保存(超过1周)分装冻存:将未使用的板条分装后,密封保存于-20℃(避免-80℃反复冻融),并标记冻存日期。干燥剂辅助:冻存时需额外加入干燥剂,防止结冰或水分残留。3.使用前的处理平衡温度:从冰箱取出后,需在室温(20...
2025 9-16
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ELISA板的基本使用流程ELISA板的基本使用流程ELISA板(酶标板)是ELISA实验的核心载体,其使用需遵循标准化操作流程,主要包括以下步骤:板条拆装与保存使用可拆卸酶标板时,轻推底部拆下所需板条,剩余板条需密封后4℃保存(避免干燥失效)。未使用的板条应连同干燥剂放回铝箔袋,密封保存于4℃冰箱。样本与标准品处理样本需离心(4℃,1000g,5分钟)去除杂质,标准品需稀释为梯度浓度(如1:2倍比稀释)。加样时每孔100μL,悬空加入避免气泡,不同浓度需更换枪头。孵育与洗涤加样后37℃...
2025 9-16
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小鼠单克隆抗体的制备过程小鼠单克隆抗体的制备过程小鼠单克隆抗体制备的核心是通过杂交瘤技术将免疫小鼠的B细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选出能稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞。以下是关键步骤与要点:1.抗原免疫小鼠抗原选择:需高纯度蛋白(90%)或偶联载体的小分子抗原(如KLH偶联多肽)。佐剂乳化:初次免疫:抗原与弗氏wanquan佐剂(FCA)乳化(油包水状态)。加强免疫:后续使用弗氏不wanquan佐剂(FIA)或直接注射抗原。免疫方案:皮下多点注射(如腋下、腹股沟),间隔2-4周加...
2025 9-15
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实验室微量操作好帮手!微量离心管的核心性能与使用价值无论是生物医学研究、化学分析还是环境科学,微量样本的处理和分离都对实验结果的准确性和可靠性起着至关重要的作用。微量离心管作为实验室中重要的工具,以其独特的设计和性能,为微量操作提供了极大的便利和支持。本文将深入探讨它的核心性能与使用价值,帮助实验室人员更好地理解和利用这一重要工具。一、核心性能(一)高精度的容量控制微量离心管的设计允许精确控制样本的容量。在许多实验中,样本的量非常有限,因此需要高精度的容量控制来确保实验的准确性。离心管通常具有清晰的刻度标记,能够帮助实验人员精...
2025 9-15
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细胞爬片实验中的常见陷阱与解决方案细胞爬片实验中的常见陷阱与解决方案1.爬片选择不当导致贴壁失败材质问题:劣质爬片(如未经过TC处理的玻片)会导致细胞贴壁不均或脱落,建议选择经多聚赖氨酸或胶原蛋白包被的爬片。尺寸匹配:爬片与培养皿/孔板尺寸不匹配(如12mm爬片用于24孔板)可能影响细胞铺展,需确保爬片浸没于培养基中。2.操作不当引发细胞损伤固定与洗涤:固定时使用4%多聚甲醛(PFA)时间过长(15分钟)或甲醇浓度过高(100%)会导致细胞结构破坏,建议优化固定条件。洗涤暴力:PBS漂洗时水流...
2025 9-15
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ELISA常见类型的分类及原理特点ELISA常见类型的分类及原理特点以下是ELISA常见类型的分类及原理特点,本生结合高可信度来源整理:一、ELISA四大核心类型直接ELISA原理:抗原直接包被于固相载体,酶标一抗直接检测抗原。特点:步骤简单(无需二抗),但灵敏度较低(信号未放大),背景较高。应用:病毒颗粒检测(如HPV)、纯化蛋白定量。间接ELISA原理:抗原包被后,先加一抗,再用酶标二抗检测一抗。特点:信号放大5-10倍,灵敏度高;但可能因二抗交叉反应增加背景。应用:HIV抗体...
2025 9-15
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elisa的原理、试剂和操作?elisa的原理、试剂和操作?以下是关于ELISA(酶联免疫吸附测定)的原理、试剂及操作流程的详细解析,本生综合了高可信度来源的核心信息:一、ELISA原理ELISA基于抗原-抗体特异性结合反应,通过酶标记放大信号实现检测,其核心步骤包括:固相化:抗原或抗体吸附于固相载体(如96孔板)表面,保持免疫活性。反应与洗涤:待测样本与固相抗原/抗体结合,洗涤去除未结合物质。酶标记检测:加入酶标抗体(或二抗),催化底物显色,颜色深浅与目标物浓度成正比。技术优势:灵敏...
2025 9-15
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本生解析竞争法在ELISA中的两种计算方法本生解析竞争法在ELISA中的两种计算方法竞争法ELISA的两种主要计算方法如下,结合实验规范与数据分析要点:一、阳性判定值法计算步骤先计算阴性对照(NCX)和阳性对照(PCX)的平均吸光度(A值),要求(NCX-PCX)差值≥0.300(如抗HBc检测试剂盒)。阴性对照A值需满足:≥0.5×NCX且≤1.5×NCX,超出范围需剔除或重测。阳性判定值公式:判定值=0.4×NCX+0.6×PCX若样本A值≤判定值,判为阳性;反之阴性。适用场景需严格验证实验有效性(如...
2025 9-12